NF-kB信号通路在磨损颗粒诱导炎症性骨溶解中的作用研究
批准号:
81201441
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
23.0 万元
负责人:
张伟
依托单位:
学科分类:
运动系统疾病研究新技术与新方法
结题年份:
2015
批准年份:
2012
项目状态:
已结题
项目参与者:
高聿同、孙成良、田周斌、李涛、赵芳芳、张波
中文摘要
无菌性松动是人工关节关节置换术的重要并发症,这种无菌性松动严重阻碍了人工关节的推广应用,如何有效地通过非手术方式来预防和治疗人工关节无菌性松动已成为关节外科领域的研究热点。无菌性松动发生的生物学基础是磨损颗粒诱发的一系列炎症反应及破骨细胞的活化导致的骨溶解。前期研究表明,核转录因子kappaB (NF-kB)信号通路在炎症发生及破骨细胞的活化中都起到了重要作用。本研究将利用无菌性骨溶解的动物模型,探讨NF-kB信号通路在磨损颗粒诱导的炎症性骨溶解中的作用,并利用干扰技术对NF-kB p65亚基进行抑制,从而观察其对炎症反应及骨溶解的缓解作用。本研究将为人工关节置换术后无菌性松动的生物学治疗领域提供理论基础和新的思路。
英文摘要
Arthroplasty is the most effective means of treatment of severe joint disease, aseptic loosening is an important complication of arthroplasty, aseptic loosening a serious impediment to the promotion and application of artificial joints. How effective non-surgical ways to prevent and treat aseptic loosening has become the hot spot of research in the field of joint surgery. The biological basis of aseptic loosening is osteolysis caused by wear particlesinduced inflammation and osteoclast cell activation. Preliminary studies show that the nuclear transcription factor{kappa} B (NF-kB) signaling pathway play an important role in inflammation and activation of osteoclasts. In this study, the use of aseptic osteolysis in animal models to explore the role of NF-kB signaling pathway in wearparticle-induced inflammatory osteolysis, and interference technology to inhibition of NF-kB p65 subunit, in order to observe its effect on inflammation and osteolysis mitigation. The field of biological therapy for the aseptic loosening of artificial joint replacement surgery in this study provide a theoretical basis and new ideas.
按计划完成本项目研究任务。.目的:人工关节无菌性松动是人工关节置换术的主要并发症,而磨损颗粒介导的的炎症反应是引发无菌松动的主要原因。本研究通过构建小鼠的气囊植骨模型,模拟了炎症的发生,并研究了NF-KB信号通路在炎症发生中的作用,通过RNA干扰技术,抑制了NF-KBP65的表达,并观察其对炎症发生的影响。.方法:(1)设计4条靶向小鼠NF-KBP65基因的siRNA序列,构建RNAi慢病毒载体,进行重组慢病毒的包装生产。(2)将构建好的慢病毒转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7,通过Realtime PCR检测NF-KBP65基因的表达,筛选出最高效的干扰序列。(3)RNAi有效靶点慢病毒大量包装,观察体外环境下慢病毒对NF-KBP65基因表达抑制效率。(4)构建小鼠的植骨气囊模型,按照对照组(CON group),错配siRNA干预组(MS group),NF-KBP65 siRNA干预组(P65 group),通过局部气囊注射慢病毒液进行生物学干预,10天后处死小鼠取材,进行组织学和分子生物学分析。颅骨-气囊组织的HE染色观察炎性反应的程度和骨破坏的情况;从mRNA水平和蛋白水平检测颅骨-囊壁组织中P65基因的表达变化;检测P50、TNF-α和IL-1β的mRNA水平。..结果:(1)成功构建了靶向小鼠VEGF基因的siRNA表达载体,筛选出5’- CGAATCCAGACCAACAATA -3’为最高效序列。(2)成功构建了携带最高效siRNA序列的重组慢病毒。(3)靶向小鼠NF-KBP65基因的重组慢病毒在体外条件下有效抑制了P65基因的表达,干扰效率达到50.4%。(4)成功构建了小鼠植骨气囊模型,HE染色显示P65组较对照组气囊囊壁厚度显著降低(P<0.05), 炎症细胞数目显著减少(P<0.05),骨破坏程度减轻。P65组中颅骨-气囊组织P65基因的mRNA水平和蛋白水平表达较对照组显著降低(P<0.05),P50、TNF-α和IL-1β的mRNA水平表达也显著降低(P<0.05)。.结论:(1)应用RNA干扰技术在体外和体内条件下可以有效的抑制NF-KBP65基因的表达。(2)在小鼠植骨气囊模型内局部应用慢病毒介导靶向NF-KBP65siRNA能有效缓解磨损颗粒诱发的炎症性骨溶解反应。
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An association study between USP34 and polycystic ovary syndrome.
USP34与多囊卵巢综合征的关联研究
DOI:
10.1186/s13048-015-0158-y
发表时间:
2015-05-15
期刊:
Journal of ovarian research
影响因子:
4
作者:
[Zhao S, Tian Y, Zhang W, Xing X, Li T, Liu H, Huang T, Ning Y, Zhao H, Chen ZJ]
通讯作者:
Chen ZJ
Risk Factors and Early Predictors for Heterotopic Pregnancy after In Vitro Fertilization.
体外受精后异位妊娠的危险因素和早期预测因素
DOI:
10.1371/journal.pone.0139146
发表时间:
2015
期刊:
PloS one
影响因子:
3.7
作者:
[Liu M, Zhang X, Geng L, Xia M, Zhai J, Zhang W, Zhang Y, Sun Y, Zhang J, Zhu D, Zhao H, Chen ZJ]
通讯作者:
Chen ZJ
DOI:
10.1210/en.2013-1764
发表时间:
2014-04-01
期刊:
ENDOCRINOLOGY
影响因子:
4.8
作者:
[Wang, Peng, Zhao, Han, Chen, Zi-Jiang]
通讯作者:
Chen, Zi-Jiang
Variants in DENND1A and LHCGR are associated with endometrioid adenocarcinoma
DENND1A 和 LHCGR 的变异与子宫内膜样腺癌相关。
DOI:
10.1016/j.ygyno.2012.08.007
发表时间:
2012-11-01
期刊:
GYNECOLOGIC ONCOLOGY
影响因子:
4.7
作者:
[Wang, Zhenyan, Li, Tao, Chen, Zi-Jiang]
通讯作者:
Chen, Zi-Jiang
Polycystic ovary syndrome susceptibility single nucleotide polymorphisms in women with a single PCOS clinical feature
具有单一 PCOS 临床特征的女性多囊卵巢综合征易感性单核苷酸多态性
DOI:
10.1093/humrep/deu361
发表时间:
2015-03-01
期刊:
HUMAN REPRODUCTION
影响因子:
6.1
作者:
[Cui, Linlin, Li, Guangyu, Chen, Zi-Jiang]
通讯作者:
Chen, Zi-Jiang
共 6 条
基于间歇计算的实时自供能嵌入式系统设计关键技术研究
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批准号:62302270
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:30万元
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批准年份:2023
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负责人:张伟
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依托单位:
ITS2“分类阈值”的构建及其在混合中药材高通量鉴定中的应用基础
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批准号:U2106227
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项目类别:面上项目
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资助金额:55万元
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批准年份:2021
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负责人:张伟
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依托单位:
基于P450酶的深海放线菌抗肿瘤活性先导化合物发现、结构优化与作用机制研究
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批准号:--
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项目类别:--
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资助金额:266万元
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批准年份:2021
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负责人:张伟
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依托单位:
基于多模环境交互的自主安保机器人关键技术研究
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批准号:U1913204
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项目类别:联合基金项目
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资助金额:244.0万元
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批准年份:2019
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负责人:张伟
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依托单位:
混合所有制企业研发支持的公共政策选择研究
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批准号:71773066
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项目类别:面上项目
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资助金额:45.0万元
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批准年份:2017
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负责人:张伟
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依托单位:
ITS2二级结构的系统发育信息在药用植物DNA条形码中的应用价值研究
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批准号:81673551
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项目类别:面上项目
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资助金额:57.0万元
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批准年份:2016
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负责人:张伟
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依托单位:
复杂室外环境下的大视场、大范围场景感知研究
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批准号:61573222
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项目类别:面上项目
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资助金额:66.0万元
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批准年份:2015
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负责人:张伟
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依托单位:
海洋真菌喹唑啉酮生物碱中环丙烷结构单元的生物合成机制与合成生物学研究
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批准号:31570030
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项目类别:面上项目
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资助金额:62.0万元
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批准年份:2015
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负责人:张伟
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依托单位:
山茶科花瓣机械系统的生物力学特性及其适应性研究
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批准号:31300194
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:23.0万元
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批准年份:2013
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负责人:张伟
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依托单位:
自由无拘束多曝光融合的研究
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批准号:61203253
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:24.0万元
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批准年份:2012
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负责人:张伟
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依托单位:
拟南芥CML24参与花粉萌发及花粉管极性生长的分子机理
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批准号:31271506
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项目类别:面上项目
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资助金额:70.0万元
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批准年份:2012
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负责人:张伟
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依托单位:
混合寡头模型下反垄断政策设计及执行研究
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批准号:71173134
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项目类别:面上项目
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资助金额:32.0万元
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批准年份:2011
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负责人:张伟
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依托单位:
拟南芥保卫细胞蛋白激酶GPK1参与干旱胁迫响应的分子机理研究
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批准号:31170236
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项目类别:面上项目
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资助金额:60.0万元
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批准年份:2011
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负责人:张伟
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依托单位:
国内基金
海外基金