研究背景：HIV主要感染CD4+T淋巴细胞，可通过多种方式破坏CD4+T细胞，而诱导凋亡则是其破坏淋巴细胞的主要途径。而Tat蛋白具有一个显著特征，就是可由感染细胞合成产生并蛋白质转导作用自由进入和影响未感染的正常细胞，产生所谓的“旁效应(bystander effect)”，诱导细胞凋亡。为了深入研究Tat干扰细胞周期并诱发细胞凋亡的分子机制，我们筛选了Tat新的相互作用蛋白。结果我们筛选到Tat新的相互作用蛋白Plk1。我们前期研究证实Tat与Cyclin B1相互作用，而Tip60(Tat interactive protein, 60kD)就是通过筛选Tat相互作用蛋白而发现的。上述结果提示Tat很可能与Cyclin B1、Plk1、Tip60形成蛋白质复合体。研究结果：1.研究发现，Tip60与Plk1存在直接的相互作用，并且这种相互作用在G2/M期增强。Tip60的锌指及MYST结构域与Plk1相互作用，而Plk1的Polo box结构域(PBD)及激酶结构域(KD)都与Tip60相互作用，并且Plk1像夹子一样夹住Tip60。2.同时也发现Tip60通过其锌指结构域与Cyclin B1存在直接相互作用。而Plk1则主要通过其PBD与Cyclin B1相互作用。3.免疫荧光结果证实Tip60可以分别和Plk1、Cyclin B1共定位到有丝分裂细胞的中心体上，两步免疫共沉淀实验证实这三者的确可以形成复合体，这也是世界上首次证实Tip60通过与Plk1、Cyclin B1相互作用来直接参与细胞周期调控。4.有文献报道Tip60存在两个磷酸化位点S86、S90，我们证实这两个位点的磷酸化可以抑制Tip60与Plk1及Cyclin B1的相互作用。另外我们还证实Tip60可以乙酰化Plk1而不能乙酰化Cyclin B1，这种乙酰化对细胞周期的影响及分子机制还有待深入研究。5.我们证实Tat可以与Plk1的PBD及KD发生相互作用，并抑制其对Cyclin B1 S133的磷酸化。此外Tat还可以增强Tip60、Plk1及Cyclin B1之间的相互作用。激光共聚焦实验证实，Tat可以诱导Plk1、Cyclin B1在间期入核，从而与Tip60形成大的蛋白质复合体。结论：本项研究在世界上首次证实DNA损伤修复蛋白Tip60直接参与细胞周期调控，对研究Tip60的功