糖尿病状态下肾小管血管紧张素Ⅱ受体和脂联素受体二聚化及对受体信号通路的影响

受体二聚化在受体功能调节中发挥重要作用。研究发现，血管紧张素（Ang）Ⅱ和脂联素受体（AdipoR）可在非洲绿猴肾细胞中形成异源二聚体。但关于糖尿病状态下肾小管AngⅡ受体和AdipoR是否存在相互作用，目前尚无相关报道。本课题通过体外培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E），探讨高糖对AT1、AT2 和 AdipoR1、AdipoR2 受体表达的影响，检测AngⅡ与AdipoR异源二聚体在NRK-52E细胞中是否存在及其可能存在形式，评价这些相关受体及二聚体形成在高糖诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及可能机制；同时通过一次性腹腔注射1%STZ(60mg/kg)，成功制备1型糖尿病肾病大鼠模型探讨在糖尿病肾病模型中，观察AngⅡ与AdipoR异源二聚体在糖尿病肾病大鼠肾组织中的存在形式及在糖尿病肾病发生发展中的作用；分别在体内及体外实验中评价替米沙坦对ATs-AdipoRs二聚体的影响。我们研究结果证实AT1、AT2、AdipoR1、AdipoR2在大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）中均有表达，高糖刺激下，AT1 、AT2表达增加， AdipoR1/2 mRNA表达增加， AdipoR1/2 蛋白水平表达无明显改变；而脂联素可缓解波动性高糖诱导的NRK-52E细胞凋亡，其机制与 AMPK/P38MAPK及AdipoR1有关。同时，我们还发现NRK-52E 细胞中存在AdipoR1-AT1、AdipoR2-AT1、AdipoR2 -AT2、AT1-AT2多种二聚体形式，且高糖可促进AdipoR1-AT1、AdipoR2-AT1、AdipoR2-AT2二聚体形成，抑制AT1-AT2二聚体形成；高糖刺激下，AT1-AdipoR1二聚化通过介导肾小管上皮细胞炎性损伤及诱导肾小管上皮细胞凋亡，促进其纤维化的发生发展。体内实验也证实：AngⅡ受体与AdipoR在大鼠肾组织内可形成二聚体，并可能参与大鼠1型糖尿病肾病的发生发展，替米沙坦可通过抑制AT1相关的二聚化的形成延缓糖尿病肾病的进展。本实验对于糖尿病状态下肾脏AngⅡ受体与AdipoR二聚化及其功能的研究是一个全新的科研领域，本项目揭示脂联素和AngⅡ在糖尿病肾脏疾病（DKD）发生发展中的相互作用及其分子机制，明确ARB对AngⅡ受体与AdipoR二聚化的影响，从而为DKD防治寻求新的靶点。