HCV引起慢性肝病严重危害人类健康。目前缺乏理想治疗药物,尚无有效疫苗问世。治疗性DC疫苗是最有前途攻克HCV持续感染的新技术,导入外源基因进入DC的方法是决定疫苗免疫应答的关键环节。近年研究发现，LM对DC和单核/吞噬细胞有独特的亲嗜性,并具有免疫佐剂效应，受到学者的重视。. 本课题应用同源重组技术成功构建了毒力因子actA和inlB双缺失的李斯特菌突变株，为重组疫苗治疗感染性疾病提供了一个平台。动物实验表明所构建的actA和inlB双缺失李斯特菌突变株毒力显著下降。雄性BALB/c小鼠动物毒力试验中，重组菌株所测得的LD50为1.47×108CFU，野生型细菌所测得的LD50为 6.81×104CFU，数据表明重组菌毒力降低了4个数量级。雌性BALB/c小鼠动物毒力试验中，重组菌株所测得的 LD50为3.16×107CFU，野生型细菌所测得的LD50为6.81×105CFU，数据表明重组毒力降低了2个数量级。通过双基因缺失毒力因子actA和inlB获得毒力显著降低的减毒菌，表明actA和inlB是产单核细胞李斯特菌的重要毒力因子。成功构建重组HCV多表位基因减毒菌（LM-E1、LM- NS4B&P7 、LM-NS4B&P7&E1），为疫苗研究奠定基础。. 细胞实验结果表明：表达HCV多表位基因减毒李斯特菌可促进DC细胞成熟。LM-HCV刺激imDC细胞后，流式细胞术检测DC细胞表面标记物表达显著升高。ELISA检测LM-HCV与DC细胞共培养上清发现：表达HCV多表位基因减毒李斯特菌可促进DC分泌IL-12，从而增强DC细胞功能。CCK-8实验结果表明：表达HCV多表位基因减毒李斯特菌可增强淋巴细胞活性。.