本项目研究中我们从海洋假单胞菌P8005筛选获得了两个新型海藻糖合酶基因g526和g649,对这两个基因进行克隆表达、蛋白质纯化。对重组蛋白G526和G649进行酶学性质研究、酶的结构模拟、结构与功能关系等多方面研究，阐明了与G526中参与底物结合及副产物形成的重要的结构基础，同时也阐明了与G649副产物葡萄糖少以及热稳定性较好的结构基础。本研究为新型海藻糖合酶G526与G649的酶学性质优化及应用提供了理论依据。主要研究结果如下：.1、从P8005菌株中获得两个海藻糖合酶的编码基因g526和g649，g526基因序列已提交Genebank（登录号：JQ951963）。.2、构建了g526和g649基因的原核表达载体，优化重组表达及蛋白纯化条件，获得纯化的G526蛋白和G649蛋白，纯度大于95%。获得的重组蛋白能将麦芽糖转化为海藻糖。.3、对G526进行酶学性质研究 发现其对底物麦芽糖转化率很高（72%），并且其生成的副产物葡萄糖含量较少(经12h反应至平衡点小于5%)。.4、对G649开展酶学性质研究，发现G649具有很高的催化效率（kcat/Km 为2600mol-1/s-1），并且其副产物葡萄糖的量非常低（经12h反应至平衡点小于1%）。此外，G649 在中性pH条件下热稳定性也较好。 .5、G526 N端的结构域以同源建模获得模拟结构。结构分析、定点突变、酶学性质研究表明G526中以下残基与底物结合及副产物葡萄糖形成相关：D78，Y81，H121，D219，E261， H331，D332，R414。同位素底物标记实验表明G526在催化麦芽糖和海藻糖相互转化过程中采用分子内机制。.6、基于多重序列比对及折叠识别G649获得的模拟结构具有高的可信度分值（100%）。通过分子对接，获得G649与底物麦芽糖、产物海藻糖及副产物葡萄糖相互作用的信息。结构模拟与分析表明： G649活性中心的形状不利于水分子进入活性中心内部，从而不容易形成副产物葡萄糖。此外，结构分析结合定点突变表明，G649中以下残基与底物结合与催化、副产物葡萄糖的形成相关：D112 F115 E257 D294 Q337。.