基于“调和阴阳”的中医理论通过PI3K/AKt/mTOR信号通路研究电针对类风湿关节炎滑膜细胞自噬的影响
批准号:
81804204
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
刘梨
依托单位:
学科分类:
H3118.中医针灸学
结题年份:
2021
批准年份:
2018
项目状态:
已结题
项目参与者:
艾坤、刘美荣、刘伟、石佳、祁芳、易细芹、马明珠、张驰、胡小珍
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中文摘要
类风湿性关节炎(RA)是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要疾病之一。自噬对RA病情的发展起关键作用。抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路可诱导细胞自噬,促进滑膜细胞凋亡,抑制细胞增生。本项目以RA动物模型(AA大鼠)为受试对象,采用电针治疗,运用光镜、放免、免疫组化、RT-PCR、Western-blot 等检测手段,通过对滑膜组织形态结构、炎性细胞因子、生长因子、滑膜细胞P13K、Akt、mTOR蛋白表达、滑膜细胞自噬体的形成、自噬体膜标志性蛋白质、自噬相关基因Beclin-1、ULK1、Atg13的mRNA表达水平及胞浆内凋亡抑制因子c-IAP1、c-IAP2、Bcl-2、凋亡蛋白Caspase3/6/9表达的检测,研究电针对RA大鼠滑膜细胞自噬的影响,探索电针是否通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导细胞自噬,抑制滑膜细胞增生和抗炎的机制。
英文摘要
Rheumatoid arthritis (RA) is one of the major diseases that cause loss of labor and disability. PI3K/Akt/mTOR signal pathway regulating autophagy plays a key role in the development of RA. Inhibition of PI3K/Akt/mTOR signal pathway can induce cell autophagy, promote apoptosis of synovial cell , inhibit cell proliferation.This project uses the animal model of RA (AA rats) as subjects,uses electroacupuncture treatment,uses the light microscopy, radioimmunoassay, immunohistochemistry, RT-PCR and Western-blot and other detection .Through the detection of the expression of synovial tissue morphological structure,inflammatory cytokines, Growth factors、P13K、Akt、mTOR protein expression, synovial cell autophagosome formation, autophagic membrane marker proteins, mRNA expression of autophagy-related genes Beclin-1、ULK1、 Atg13,the expression of apoptosis inhibitory factor c-IAP1、c-IAP2、Bcl-2 and apoptotic protein Caspase3/6/9,to study the effect of electrocution on autophagy of synovial cell in RA rats,and to explore whether electroacupuncture can promote apoptosis and anti-proliferation of RA synovial cells by inhibiting PI3K/Akt/mTOR signal pathway regulating autophagy
本项目以RA动物模型(AA大鼠)为受试对象,采用电针治疗,运用电镜、放免、免疫组化、RT-PCR、Western-blot等检测手段,通过对滑膜组织形态结构、炎性细胞因子、滑膜细胞P13K、Akt、mTOR蛋白表达、滑膜细胞自噬体的形成、自噬相关基因的表达水平及胞浆内凋亡抑制因子、凋亡蛋白表达的检测,研究电针对RA大鼠滑膜细胞自噬的影响,探索电针是否通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导细胞自噬,抑制滑膜细胞增生和抗炎的机制。.已开展并完成的研究内容有:.(1)选用Fueund氏完全佐剂(FCA)造模法,以AA大鼠为研究对象,采用电针疗法,以RA的常用治疗药物甲氨蝶呤作为对照,运用光镜观察电针对AA大鼠炎症局部滑膜组织细胞形态学的影响;运用免疫组化检测AA大鼠炎症局部滑膜组织和血浆中致炎细胞因子(TNF-α、IL-1);运用RT-PCR检测AA大鼠滑膜细胞胞浆内凋亡抑制因子c-IAP1mRNA、c-IAP2mRNA、运用Western-blot检测凋亡因子Fas、FasL、Caspase3的蛋白表达;运用电镜观察滑膜细胞自噬体。.(2)以PI3K/Akt/mTOR信号通路为切入点,围绕RA滑膜细胞自噬,以AA大鼠为研究对象,采用电针疗法,以PI3K抑制剂NVP-BEZ235作为对照,运用电镜观察滑膜细胞自噬体;运用Western-blot检测PI3K、Akt、mTOR、p-mTOR、ULK1、Beclin1、LC3的蛋白表达;运用RT-PCR检测检测ULK1mRNA、Atg13mRNA的表达水平。 .项目3年期限已执行完毕,目前明确了电针对PI3K/Akt/mTOR信号通路和RA滑膜细胞自噬的调节效应,为开展临床研究提供扎实的动物实验参考数据,整体已达到预期研究目标。.已在核心期刊发表学术论文7篇,培养研究生2人。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2020
期刊:湖南中医药大学学报
影响因子:--
作者:祁芳;李艳玲;艾坤;蔡雄;李鑫;刘梨;杨茜芸
通讯作者:杨茜芸
Effect of electroacupuncture on c-IAP1 mRNA and c-IAP2 mRNA in synovial tissues of rats with adjuvant arthritis
电针对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织c-IAP1 mRNA和c-IAP2 mRNA的影响
DOI:10.1007/s11726-019-1088-9
发表时间:2019-02
期刊:JOURNAL OF ACUPUNCTURE AND TUINA SCIENCE
影响因子:0.5
作者:Ai Kun;Li Yan-ling;Qi Fang;Liu Li;Chang Xiao-rong;Yu Zhao-an
通讯作者:Yu Zhao-an
DOI:--
发表时间:2021
期刊:陕西中医
影响因子:--
作者:鲍秋羽;席建元;刘梨
通讯作者:刘梨
DOI:--
发表时间:2022
期刊:海南医学院学报
影响因子:--
作者:周兰;周巍;黎铭玉;刘梨;刘密
通讯作者:刘密
DOI:--
发表时间:--
期刊:针刺研究
影响因子:--
作者:刘梨;周巍;黎铭玉;周兰;张亮;王文怡;龚志贤;艾坤
通讯作者:艾坤
电针调控Treg细胞来源外泌体介导CD39/CD73/A2a腺苷通路对类风湿关节炎T细胞免疫抑制的机制研究
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:52万元
- 批准年份:2022
- 负责人:刘梨
- 依托单位:
国内基金
海外基金















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