自噬靶蛋白mTOR在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染中调控树突状细胞亚群分化及抗原提呈的机制研究

批准号:
31502070
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
刘金玲
依托单位:
学科分类:
C1802.兽医病毒学
结题年份:
2018
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
沈国顺、魏澍、李夏莹、陈晓月、付玉洁、郭士琪、董烨
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中文摘要
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起免疫抑制的机制之一是抑制树突细胞(DC)的功能,但其确切机制尚不清楚。研究表明,自噬靶蛋白mTOR在DC免疫应答中发挥重要作用,而且PRRSV能通过诱导自噬促进自身增殖。本项目以此为切入点,研究mTOR在PRRSV感染中对DC的免疫调控。本研究拟以感染PRRSV猪外周血、骨髓、脾脏中分离的DC为研究对象,结合mTOR特异性抑制剂和激动剂,通过流式细胞术、ELISA等技术检测mDC/pDC亚群表型、亚群分化相关分子及Th1/Th2偏转情况,研究PRRSV通过mTOR对DC亚群分化的调控。采用RT-PCR、免疫印迹、荧光显微镜等方法测定抗原提呈、自噬相关基因和蛋白的水平,阐明PRRSV通过mTOR对DC功能的调控,从DC亚群失衡和DC抗原提呈紊乱的角度揭示PRRSV通过mTOR调控DC自噬水平来抑制DC功能的机理,从新的角度揭示PRRSV免疫抑制机制。
英文摘要
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) can inhibit the function of dendritic cell(DC),but the mechanism of immunosuppression has not been elucidated.Recent research showed that target protein mTOR of autophagy has an important role on immune response of DC.While,PRRSV can promote its proliferation by inducing autophagy. We had the research of mTOR immune regulation of DC during the infection of PRRSV based on the breakthrough point.The project intends to separate DC from peripheral blood,bone marrow and spleen with PRRSV infection as research model,binding specificity mTOR inhibitors and agonist.We will investigate the differentiation regulation of mTOR from mDC/pDC subtypes,differentiation related molecules and Th1/Th2 polarization by using techniques as ELISA,flow cytometry.And it will study the change of DC autophagy and the effect on antigen presentation from the gene and protein expression level by immunofluorescence,western blot and RT-PCR. It will identify dynamic regulation of mTOR from the subgroup of imbalances and immune dysfunction on DC. Thus it will reveal the immunosuppressive mechanism via autophagy level of DC by PRRSV and the pathogenic mechanism of PRRSV from a new perspective.
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起免疫抑制的机制之一是抑制树突细胞(DC)的功能,但其确切机制尚不清楚。研究表明,自噬靶蛋白mTOR在DC免疫应答中发挥重要作用,而且PRRSV能通过诱导自噬促进自身增殖。本项目以此为切入点,研究mTOR在PRRSV感染中对DC的免疫调控。本研究拟以感染PRRSV猪外周血、骨髓、脾脏中分离的DC为研究对象,结合mTOR特异性抑制剂和激动剂,通过流式细胞术、ELISA等技术检测mDC/pDC亚群表型、亚群分化相关分子及Th1/Th2偏转情况,研究PRRSV通过mTOR对DC亚群分化的调控。采用RT-PCR、免疫印迹、荧光显微镜等方法测定抗原提呈、自噬相关基因和蛋白的水平,阐明PRRSV通过mTOR对DC功能的调控,从DC亚群失衡和DC抗原提呈紊乱的角度揭示PRRSV通过mTOR调控DC自噬水平来抑制DC功能的机理。研究结果表明PRRSV感染能够引起DCs自噬,自噬能够降低DCs的抗原提呈功能。即促进了自噬基因Beclin-1、Atg7的转录,自噬长寿蛋白p62的降解,诱导了LC3-I向LC3-II转化;抑制了抗原提呈相关基因Lamp-1的转录,而对TAP-1和CD40的转录水平影响不显著。不同毒力PRRSV诱导DCs的自噬水平不同进而引起DCs亚群分化。PRRSV弱毒诱导的DCs自噬水平高于PRRSV强毒,并能够利用自噬促进自身的复制,促进DCs从早期的pDCs向mDCs亚群分化介导Th2型免疫反应。PRRSV强毒促进DCs向pDCs亚群分化介导Th2型免疫反应,而PRRSV强毒只在自噬早期时促进自身的复制。本研究从新的角度揭示PRRSV免疫抑制机制。为PRRSV的防治提供新靶点和新思路,同时为更加有效的进行以DCs为基础的抗病毒免疫治疗及PRRS新型疫苗设计提供一定的实验基础和理论支持,对控制PRRS的发生具有重要意义。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2018
期刊:动物医学进展
影响因子:--
作者:陈小琴;赵一霏;孙岩;冯晓慧;曹辉;魏澍;姚龙泉;张飞;沈国顺;刘金玲
通讯作者:刘金玲
DOI:--
发表时间:2018
期刊:黑龙江畜牧兽医
影响因子:--
作者:陈小琴;赵一霏;孙岩;冯晓慧;曹辉;魏澍;姚龙泉;张飞;沈国顺;刘金玲
通讯作者:刘金玲
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2016.07.02
发表时间:2016
期刊:中国兽医学报
影响因子:--
作者:刘金玲;魏澍;沈国顺;赵玉军;潘树德;刘丽霞
通讯作者:刘丽霞
The role of porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection in immune phenotype and Th1/Th2 balance of dendritic cells
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对树突状细胞免疫表型及Th1/Th2平衡的影响
DOI:10.1016/j.dci.2016.07.012
发表时间:2016-12-01
期刊:DEVELOPMENTAL AND COMPARATIVE IMMUNOLOGY
影响因子:2.9
作者:Liu, Jinling;Wei, Shu;Shen, Guoshun
通讯作者:Shen, Guoshun
基于非洲猪瘟病毒pS273R蛋白泛素-蛋白酶体降解途径阻抑机制理性设计其特异性蛋白水解靶向嵌合体的研究
- 批准号:32373044
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:50万元
- 批准年份:2023
- 负责人:刘金玲
- 依托单位:
国内基金
海外基金
