绵羊支原体肺炎又称绵羊传染性胸膜肺炎，是由绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)引起的高度接触性呼吸道传染病。该病可见于绵羊和山羊，也可感染野生动物如大角羊等，是一种世界性的传染病。对1-3 月龄的羔羊有较高的感染率和致死率，尤其在某些种羊场中，绵羊支原体肺炎流行严重，发病率达2%-10%，死亡率高达100%。. MO属柔膜菌纲、支原体目、支原体科、支原体属。目前认为，柔膜菌是能够独立生存的、基因组最小的生物体。对于柔膜菌的分析可以使我们得以探讨自然界中最小的生命形态，具有一定的普遍意义。. 碳代谢与柔膜菌的致病机制密切相关。在对肺炎支原体、丝状支原体丝状亚种SC 型（M.mycoides subsp. mycoides SC）的研究中均认为甘油是支原体的主要碳源，且其代谢产物H2O2 是该菌的主要致病因素。MO有关甘油代谢的研究目前尚属空白。因此，本项目在MO Y98 株（ATCC29419）基因组学测定及分析的基础上，对该菌可能的甘油代谢基因GlpO 功能进行了研究：. 根据MO Y98株glpO基因序列，对glpO密码子进行优化后，构建了其原核表达载体，获得了其重组蛋白GlpO，大小约为44KD；制备了抗GlpO抗体、纯化获得了抗GlpO IgG；采用western blot、免疫荧光技术、电镜技术对GlpO 定位进行了研究，证明其为膜蛋白；酶活性分析表明，GlpO重组蛋白可催化G3P产生H2O2，证明其具有甘油-3-磷酸氧化酶活性，且H2O2的产生水平与G3P成正相关；MO菌体催化底物G3P产生H2O2水平可被GlpO抗体抑制，表明MO产生H2O2与GlpO相关；明确了GlpO具有FAD结合位点，且其催化G3P产生H2O2的浓度与FAD含量成正相关；获得了GlpO FAD结合位点缺失突变体----GlpO△FAD及该位点单个Gly15、Gly17、Gly20缺失突变体----GlpO△Gly15、GlpO△Gly17、GlpO△Gly20；体外氧化酶活性检测实验表明，上述突变体均不再具备催化G3P产生H2O2的能力；通过细胞水平检测及动物毒力实验检测表明，与GlpO相比，突变体对于靶细胞的存活及小鼠肺脏的毒力的影响均显著降低。研究结果为MO致病机制研究及免疫预防等提供理论基础。