HINT1介导泛素/Skp2及Rac1调控人肝癌细胞NF-κB转录因子活性的作用机制研究

批准号:
81060204
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
25.0 万元
负责人:
王琳
依托单位:
学科分类:
H1819.肿瘤生物治疗
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
朱红、陆晓青、邹浩、李晓、戈佳云、王琨、吴涛、王聪、刘波
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中文摘要
本项目对三组氨酸核苷结合蛋白1(HINT1)介导泛素SKP2及RAC1调控肝癌细胞NF-κB转录因子的机制进行研究:①HepG2细胞共转导Hint1、Rac1及Skp2,免疫荧光及免疫沉淀检测HINT1与RAC1、 SKP2结合;②Hint1或pGenesil-Hint1转导,检测IκBα、pIκBα及细胞质、核中p65表达;共转导HA-hint1, Flag-IκBα及myc-Ubiquitin,检测Flag-IκBα泛素化;NF-κB/Luc及pGenesil-Hint1转导,检测转录因子活性;③pGenesil-Hint1与Rac1共转导,检测JNK1/2及pJNK1/2表达;检测转录因子活性④检测临床标本中HINT1、Rac1、SKP2、NF-κB表达并研究其相关性。HINT1调控NF-κB转录因子的机制研究,目前尚无文献报道。本项目对研发肝癌诊断标记物及肝癌基因治疗等有重要意义。
英文摘要
发现新抑癌基因(Hint1)及其蛋白(HINT1)对肝细胞性肝癌的诊断和基因治疗有重要意义。本项目对组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(HIT nucleotid binding protein-1,HINT1)的功能进行研究:①载体构建:构建HA标识Hint1基因;②体外实验:检测过表达外源HINT1对人肝癌细胞体外增殖的影响;通过western blot检测转染Hint1后的肝癌细胞中Rac1、SKP2、NF- κB、IκBα、SCFβ-TrCP、Girdin、Akt蛋白表达;检测干扰Hint1后的肝癌细胞中IκBα、Girdin蛋白表达;通过免疫荧光共聚焦检测HINT1与特定信号蛋白的共定位关系;通过免疫共沉淀实验检测HINT1与特定信号蛋白(SCFβ-TrCP、Girdin等)的相互作用关系;③临床相关实验:检测HINT1及相关蛋白激酶、转录因子在临床肝癌标本中表达。该项目居国际Hint1基因功能研究前沿。研究目标为证实HINT1抑制肝细胞性肝癌增殖并发现其抑癌的部分分子机制研究及信号传导途径。本研究对研发肝癌的早期诊断生物标志物及肝癌的基因治疗有重要意义。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
WW domain containing oxidoreductase induces apoptosis in gallbladder-derived malignant cell by upregulating expression of P73 and PUMA
含有WW结构域的氧化还原酶通过上调P73和PUMA的表达诱导胆囊源性恶性细胞凋亡
DOI:10.1007/s13277-013-1213-1
发表时间:2014-02
期刊:Tumor Biol
影响因子:--
作者:王琳
通讯作者:王琳
DOI:--
发表时间:2013
期刊:医学综述
影响因子:--
作者:王琳
通讯作者:王琳
FHIT overexpression in HepG2 hepatoma cells affects growth and cyclin D1 expression in vitro.
HepG2 肝癌细胞中 FHIT 过表达影响体外生长和细胞周期蛋白 D1 表达
DOI:10.3892/etm.2013.1436
发表时间:2014-02
期刊:Experimental and therapeutic medicine
影响因子:2.7
作者:Ge J;Shen S;Zhang X;Wang K;Liu B;Sun D;Wang L
通讯作者:Wang L
DOI:--
发表时间:2010
期刊:中国现代普通外科进展
影响因子:--
作者:朱红;邹浩;王琨;黄松泉;李越华;王炳煌;王琳
通讯作者:王琳
巨噬细胞LY6E通过调控LIMK/CFL通路介导隧道纳米管传输线粒体促进肝细胞癌增殖的机制研究
- 批准号:82372810
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:49万元
- 批准年份:2023
- 负责人:王琳
- 依托单位:
LncRNA ETAPOD1作为miR-101b-3p的海绵调控肝细胞癌的侵袭迁移能力
- 批准号:81860423
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:38.0万元
- 批准年份:2018
- 负责人:王琳
- 依托单位:
膜相关鸟苷酸激酶Dlg5通过Girdin/Tks5轴调节肝细胞癌侵袭性伪足形成的机制研究
- 批准号:81660399
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:37.0万元
- 批准年份:2016
- 负责人:王琳
- 依托单位:
Hint1与Girdin/Akt及Src信号通路串话在肝癌细胞增殖中的调控机制
- 批准号:81360360
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:50.0万元
- 批准年份:2013
- 负责人:王琳
- 依托单位:
HINT1 调控人肝癌细胞增殖及转录因子活性的分子机制及相关信号传导途径
- 批准号:30660184
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:23.0万元
- 批准年份:2006
- 负责人:王琳
- 依托单位:
国内基金
海外基金
