细粒棘球蚴G1Y162抗原优势表位的筛选及其免疫特性的研究

新疆是我国包虫病高发区之一，研制有效的控制包虫病流行的新型疫苗是促进西部牧区经济发展的迫切需要。方法：本研究在前期获得重组GIY162 蛋白的基础上，采用多软件生物信息学方法预测其表位及所在位置，将GIY162 中所包含的表位肽段用分子生物学的方法进行克隆，诱导，原核表达，获得重组蛋白，免疫小鼠感染模型，检测抗体效价、T 淋巴细胞增殖反应、Th1/Th2型细胞因子等各项指标，探讨含有优势表位的重组蛋白疫苗对宿主抵抗棘球蚴感染的免疫保护作用，评价其应用前景；在此基础上，进一步免疫细粒棘球绦虫终末宿主犬，观察该疫苗的现场保护效果。结果：通过多软件生物信息学方法预测其T细胞表位、B细胞表位及T-B联合表位所在区域，选择大小不同的表位区域构建EgGIY162-1和EgGIY162-2原核表达载体，诱导纯化出分子量大小约为26.2kDa和28.1kDa的重组蛋白；重组蛋白与感染犬血清及包虫病患者血清间存在阳性反应，且能诱导感染小鼠分别产生58.10%和64.10%的免疫保护作用，对终末宿主犬也有一定的保护作用。结论：含有T-B联合表位区域的EgGIY162-1和EgGIY162-2重组蛋白疫苗对宿主抵抗棘球蚴感染具有免疫保护作用，具有潜在应用前景，为寻找控制包虫病传染源的有效疫苗，进一步开展包虫病的防治提供理论和实验基础奠定了理论及实验基础。