eIF3g在乳癌细胞转移中的作用及相关机制研究

肿瘤细胞的转移是其恶性转化的重要特征，也是肿瘤危及生命的重要原因。恶性肿瘤转移涉及的机制十分复杂，虽然目前人们已了解了很多转移相关因素，但远未达到全面的了解，需要从更多方面研究各种相关机制进行研究，为临床治疗方案的制定提供更有力的依据。本项目中我们利用四环素诱导真核细胞表达载体系统，建立了诱导型过表达外源性真核细胞翻译起起始因子的一个亚基eIF3g 或抑制内源性eIF3g 表达的乳癌细胞系，通过体内外实验，包括CCK-8实验、划痕实验、穿膜实验、基质胶侵袭实验、裸鼠荷瘤实验等手段，全面研究了eIF3g表达水平变化前后乳癌细胞的生长、迁移和侵袭转移情况，发现过表达eIF3g能够促进乳癌细胞的迁移和侵袭，而抑制eIF3g的过表达则可导致细胞生长和迁移转移能力的明显下降，明确了eIF3g 在乳癌细胞转移中的作用。我们还利用基因表达芯片、实时荧光定量RT-PCR 等技术分析eIF3g 过表达或表达抑制前后的转移相关基因表达情况，利用蛋白质免疫共沉淀、质谱分析、Western blot、蛋白质交联、GST融合蛋白下拉、细胞荧光免疫染色结合激光共聚焦共定位观察等技术研究了eIF3g 相互作用蛋白，发现真核细胞翻译起始因子亚基eIF3A、不均一核糖核蛋白hnRNP U、锌指蛋白HSZFP36和肌动蛋白beta-Actin四种蛋白质能够与eIF3g在细胞核中相互作用。我们还进一步在临床乳癌标本中检测分析了eIF3g在乳癌细胞转移中的临床意义，发现eIF3g的高表达与淋巴结转移显著正相关（P=0.001）。本项目首次发现eIF3g在乳癌中与乳癌细胞的迁移、侵袭及转移密切相关，为eIF3g 作为潜在的乳癌转移新分子标志的进一步研究及应用打下基础。