miR-448/SATB1对阿霉素诱导乳腺癌细胞上皮间质转化的作用及机制

化疗药物引起癌细胞多药耐药性产生的同时伴有肿瘤细胞侵袭和转移能力的增加。我们前期研究已报道，p-gp底物类化疗药物诱导乳腺癌多药耐药性产生的同时，通过引起癌细胞上皮-间质转化（Epithelial–mesenchymal transition，EMT)使癌细胞侵袭和转移能力增强，但其调节机制等问题尚不清楚。我们利用microRNA芯片筛选发现miR-448是p-gp底物类化疗药物作用后下调最显著的microRNA之一。本研究旨在探讨miR-448在p-gp底物类化疗药物诱导乳腺癌细胞发生EMT 过程中的重要作用及其相关的分子机制。本课题通过体内、外实验，采用基因转染和RNAi正反两方面的综合研究证实：乳腺癌细胞miR-448的抑制通过上调其靶基因SATB1(special AT-rich binding protein1)的表达，参与了化疗（阿霉素）诱导的乳腺癌细胞EMT的发生和导致癌细胞的侵袭和转移能力增强。我们使用ChIP-seq 实验方法研究发现：miR-448通过与SATB1的直接作用引起 amphiregulin 水平升高，进而增加EGFR-介导-Twist1的表达和NF-kB的活化。另一方面，我们也发现阿霉素诱导活化的NF-kB可直接与miR-448启动子结合使其转录受到抑制，提示在NF-kB和miR-448之间有一个正向反馈环。并且，接受化疗（cyclophosphamide，CP；epirubicin plus taxotere/ CP, epirubicin plus 5-fluorouracil chemotherapy）的乳腺癌病人标本检测呈现 miR-448表达下调、SATB1和Twist1 表达升高、癌细胞获得间质细胞样表型。这些结果显示NF-kB 和 miR-448之间的自身调节通路对化疗药物诱导miR-448表达的抑制及化疗诱导癌细胞的EMT发生具有重要的作用。在化疗治疗过程中，破坏NF-kB -miR-448反馈环能促进 乳腺癌细胞对化疗的敏感性，在此EMT 是关键的事件。. 其次，我们初步证实miR-130a可能通过调节PTEN基因的表达，从而激活PI3K/Akt通路，参与p-gp底物类化疗药物诱导乳腺癌细胞多药耐药产生的同时促进乳腺癌的侵袭、转移和EMT发生等过程。我们打算对此进进行深入的研究。