刺参耐寒相关基因筛选及表达研究

温度是影响刺参生存、生长发育和繁殖的重要环境因子之一，我国北方的渤海和黄海北部，由于冬季受西伯利亚南下寒潮影响，每年都有不同程度的低温、冰冻现象，严重影响了北方沿海海参养殖业，一些地区海参死亡率达80%以上，存活的海参也出现了严重化皮现象，严重影响了该产业发展的速度和规模。研究利用抑制性消减杂交技术(SSH)，分别构建刺参骤降和缓降两个双向消减cDNA文库，并对其测序结果进行分析：进行了刺参耐寒差异表达基因的克隆；为探讨低温胁迫对刺参基因表达的影响，从已构建的刺参耐寒基因筛选cDNA文库中选取8个差异基因（溶菌酶，铁蛋白，转铁蛋白，热休克蛋白70，gp96，Toll受体蛋白，主要卵黄蛋白1和主要卵黄蛋白2）并研究了其在低温处理条件下的表达；同时，进行了低温对刺参新品种“水院1号”和普通刺参免疫酶影响的初步研究，结果显示“水院1号”较大连养殖刺参群体对低温的反应更灵敏，保护机体免受氧化损伤的能力更强，为刺参耐低温品系培育过程的指标选择提供参考。研究根据国内外发展状况和生产实际，增添了低温对刺参行为影响研究；冬季养殖池塘环境因子变化研究；耐寒训练对刺参成活率及生理、生化指标的影响研究。研究揭示了刺参在低温条件下重要基因的表达模式；解析刺参在降温条件下，生理、生化的变化过程；获得低温与刺参生理代谢变化的相关信息。研究对指导刺参优良品种培育，避免低温造成的重大养殖损失，实现刺参安全生产具有十分重要的理论与实践意义。基金完成预期目标，共发表研究论文10篇，其中SCI收录2篇，另有2篇论文已投稿SCI期刊，正在审稿中；基金进行期间获授权发明专利3项，申报发明专利2项；培养从事基因克隆、表达工作的研究人员2名，共培养已毕业和即将毕业硕士研究生7名。