LXRα信号途径调控肉鸭脂质代谢的分子遗传基础研究

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项目介绍
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基本信息

  • 批准号：
    31160453
  • 项目类别：
    地区科学基金项目
  • 资助金额：
    50.0万
  • 负责人：
    张依裕
  • 依托单位：
    贵州大学
  • 学科分类：
    C1703.家禽及其他经济动物种质资源与遗传育种学
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

脂肪沉积过多是现今制约肉鸭业发展的重要因素，但关于调控肉鸭脂肪沉积相关的作用机制至今仍然还不清楚。为解释LXRα信号途径在肉鸭脂肪沉积过程中的分子遗传机制，项目采用全自动生化分析仪、气质联用技术、索氏抽提法等对肉鸭脂质性状进行测定，RT-PCR法、RACE法、实时定量PCR法等对肉鸭LXRα及其靶基因进行克隆、单倍型和表达进行研究，分析其与脂质性状的关系；构建带有强启动子和His序列标签的LXRα及其靶基因的真核表达载体，转染原代肝细胞，免疫组化法检测基因表达，分析其对肝细胞脂质沉积的影响；采用染色体步移法获取LXRα基因启动子序列，构建其荧光报告载体，转染原代肝细胞和脂肪细胞，通过在培养细胞中添加PUFA，测定荧光素酶在两种细胞中的活性变化，确定PUFA对LXRα基因启动子的转录调控作用。通过上述研究，揭示LXRα及其靶基因在脂质沉积中的信号传导机制，为降低脂肪沉积寻找新的科学依据。

结项摘要

降低肉鸭脂肪沉积是现今家禽育种中重要攻关课题。为解释LXRα信号途径对肉鸭脂肪沉积的分子机制，通过对该途径中5个关键靶基因对肉鸭脂质代谢的调控研究，结果显示：LXRα基因CDS区c.277C>G和3'-UTR区1396C>G分别对脂肪酸组成和IMF有显著效应；SCD-1基因启动子区检测到11个SNPs位点，CDS区没有检测到突变，其中g.936235A>C、g.936573G>A、g.936614G>A和g.938151T>C引起转录因子变化，g.936780T>A和g.936781G>T双碱基突变产生新的Bgl II酶切位点，g.936516C>G、g.936551T>C、g.936785G>T、g.937213C>T和g.938313C>T没有引起转录因子和酶切位点变化，Bgl II酶切变异显著影响血清蛋白组成，g.936516C>G和g.936551T>C突变组合显著影响血清TG含量；ChREBP基因外显子9的g.246911G>A突变和CD36基因外显子9的g.476593T>C突变对血清脂质TC、HDL和LDL有显著效应；SREBP1基因cds.C999G和cds.A1124G突变组成的cds.C999A1124有利于脂质的沉积；基因表达调控显示，5个基因均表现出2-10周龄随日龄增加而呈现表达上升趋势，LXRα、SCD-1、SREBP基因mRNA表达水平变化较大，ChREBP和CD36基因表达水平变化较小，5个基因mRNA表达水平与血清脂质性状呈显著关联，证明LXRα通路中靶基因表达可能主要受LXRα基因表达的调控；日粮中添加亚油酸和EPA均能降低5个基因mRNA表达量，证实了PUFA对LXRα信号具有抑制作用；构建5个基因pEGFP-N3携带His标签的表达载体，成功转染体外培养的鸭原代肝细胞，结果表明其过表达均能显著影响原代肝细胞脂质代谢；构建LXRα基因启动子载体：pGL3-LXR1（g.92556-g.95166）和pGL3-LXR2（g.92986-g.94930），转染鸭原代肝细胞，荧光素酶活性检测结果显示pGL3-LXR1和pGL3-LXR2启动子活性分别是空载体组的2.65倍和1.99倍，亚油酸和EPA均能够抑制pGL3-LXR1和pGL3-LXR2启动子的转录活性，亚油酸抑制能力强于EPA，证实PUFA是LXRα信号途径中的辅阻遏物。

项目成果

期刊论文数量（19）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
硬脂酰辅酶A去饱和酶-1基因表达及其与鸭肉质和血清生化指标的相关性分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国畜牧兽医
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张依裕;李万贵
  • 通讯作者：
    李万贵
鸭SCD1基因5#39;调控区多态与血清生化指标及肉质相关分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    基因组学与应用生物学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张依裕;潘兰兵;林家栋;李思
  • 通讯作者：
    李思
鸭LXRα基因3′-UTR多态对生长和肉质性状的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    安徽农业大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张华均;李万贵;杨毅;赵陈
  • 通讯作者：
    赵陈
鸭脂联素基因多态对肉质和血清生化指标的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    基因组学与应用生物学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李万贵;潘兰兵;林家栋;刘若余
  • 通讯作者：
    刘若余
A Novel SNP of LXRα Gene Associated with Meat Quality Traits in Cherry Valley Ducks
与樱桃谷鸭肉品质性状相关的 LXRα 基因的新 SNP
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    Pakistan J. Zool.
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Zhang Yiyu;Li Wangui
  • 通讯作者：
    Li Wangui

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其他文献

三穗鸭ORAI1基因遗传变异与蛋壳品质的相关性
  • DOI：
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  • 发表时间：
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  • 期刊：
    福建农林大学学报（自然科学版）
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    谭光辉;李杰章;覃媛钰;吴磊;张依裕
  • 通讯作者：
    张依裕
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  • 影响因子：
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    李万贵
鸭CD36基因表达载体构建及其对原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响
  • DOI：
    10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.10.30
  • 发表时间：
    2019
  • 期刊：
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  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    覃媛钰;罗华伦;吴磊;张依裕
  • 通讯作者：
    张依裕
三穗鸭SLC4A9基因表达量及其多态性对蛋壳品质的遗传效应分析
  • DOI：
    10.16431/j.cnki.1671-7236.2021.06.021
  • 发表时间：
    2021
  • 期刊：
    中国畜牧兽医
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    杨酸;张依裕;谭元成;王盈童;游敏芳;廖朝美
  • 通讯作者：
    廖朝美
樱桃谷鸭ATF4基因SNPs筛查及生物信息学分析
  • DOI：
    10.3969/j.issn.1004-1524.2020.02.05
  • 发表时间：
    2020
  • 期刊：
    浙江农业学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    谭光辉;覃媛钰;李杰章;吴磊;岳雍;张依裕
  • 通讯作者：
    张依裕

其他文献

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IP3Rs通道调控蛋鸭蛋壳品质的效应机制研究
  • 批准号：
    31760663
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    2017
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  • 项目类别：
    地区科学基金项目

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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