一个新的长链非编码RNA-CTD-3193O13.11调控miRNA141/EVi5L影响甲状腺癌侵袭转移的作用及机制研究
批准号:
81802676
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
21.0 万元
负责人:
杜雅莹
依托单位:
学科分类:
H1805.肿瘤表观遗传
结题年份:
2021
批准年份:
2018
项目状态:
已结题
项目参与者:
李兴睿、夏文飞、程腾、陈春莲、周旭东、徐滔、吴昊、李汉宁
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中文摘要
甲状腺癌早期即容易出现转移,并且影响预后。研究表明,lncRNA与甲状腺癌的转移有密切关系。申请者前期通过高通量测序,发现lncRNA CTD-3193O13.11在甲状腺癌原发灶及转移灶中表达显著增高。该lncRNA与甲状腺癌的关系,国内外尚未见报道;空间结构分析提示该lncRNA能够和miRNA141结合;组织样本检测发现miRNA141的靶蛋白Evi5L呈现协同高表达。据此我们提出科学假说:该lncRNA可能通过内源性竞争结合miRNA141上调Evi5L的表达,进而激活其下游MAPK、Shh、Wnt等重要信号通路,促进甲状腺癌上皮间质转化和侵袭转移。本项目将通过细胞实验、动物移植瘤模型,研究lncRNA CTD-3193O13.11调控miRNA141/Evi5L的具体分子机制及其对甲状腺癌侵袭转移的影响,为甲状腺癌的综合治疗提供新的策略和靶点。
英文摘要
Thyroid cancer is prone to metastasize at the early stage, which leads to a poor prognosis. Present studies have found that lncRNAs play an important role in thyroid cancer metastasis. Previously, we have found a new lncRNA CTD-3193O13.11 is significantly up-regulated both in the primary and the metastatic tissues of thyroid cancer by using high-throughput sequencing. The relationship between CTD-3193O13.11 and thyroid cancer has not been reported at present. Spatial structural analysis suggested that CTD-3193O13.11 has effective binding sites to miRNA141. Simultaneously, Evi5L which is the target protein of miRNA141 showed synergistic high expression with CTD-3193O13.11 in thyroid cancer tissue. Based on these studies, we hypothesized that the new lncRNA CTD-3193O13.11 may up-regulate the expression of Evi5L by endogenous competive binding to miRNA141, thus leading to the activation of important downstream signaling pathways such as MAPK, Shh, Wnt and promoting the epithelial-mesenchymal-translation and metastasis of thyroid cancer. This project, through the use of molecular biotechnology in cancer cell lines and xenograft animal, plans to further explore the precise biological process about CTD-3193O13.11 regulates thyroid cancer metastasis by targeting miRNA141/EVi5L. Thus providing new strategies and therapeutic targets for the comprehensive treatment of thyroid cancer.
甲状腺乳头状癌 (PTC) 是最常见的内分泌恶性肿瘤,绝大部分患者预后良好,但无法准确区分高危患者导致过度医疗问题并带来巨大经济负担,而复发转移的患者又对传统放化疗无效,急需开发新的治疗手段。我们通过67对PTC和癌旁组织的RT-qPCR检测,发现lncRNA CTD-3193O13.11在癌组织中高表达。TCGA数据库的497例癌组织和59例配对的样本分析结果一致。该lncRNA在晚期患者和伴有BRAF突变的患者中表达显著增高,生存率有所下降。在细胞层面使用 CCK8、Edu、划痕愈合、克隆形成和 transwell小室等实验探索lnc CTD的生物学功能,实验结果表明lnc CTD的敲降可抑制肿瘤增殖、迁移和侵袭能力,可下调靶标分子Evi5L的mRNA和蛋白表达。lnc CTD表达量增高可以提示甲状腺癌预后不良,复发风险增高,是具有临床转化潜力的肿瘤标记物。γ-谷氨酰环化转移酶 (GGCT) 是一种参与谷胱甘肽稳态的酶,在多种类型的肿瘤中升高,是一个潜在的治疗靶点。我们分析了178例PTC和82例正常组织的石蜡切片免疫组化结果,发现GGCT 在 PTC 中高表达,且与更具侵袭性的临床病理学特征和更差的预后相关,TCGA数据库的分析结果与我们的发现一致。CCK8、划痕愈合、transwell小室、western blot等实验结果表明,GGCT沉默可抑制PTC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,降低间充质标志物(N-cadherin、CD44、MMP-2和MMP9)的表达,同时增加了PTC细胞中的上皮标志物(E-cadherin)表达。通过构建皮下异种移植和尾静脉肺转移小鼠模型,我们明确了沉默GGCT可抑制肿瘤肺转移。我们利用双荧光素酶报告基因实验、RNA-RNA pull down测定以及体外和体内的拯救实验进一步明确了miR-205-5p与 GGCT的UTR区域可直接结合,免疫共沉淀 (Co-IP) 和 IHC 阐明GGCT促进肿瘤侵袭转移与CD44的稳定性相关。综上所述,我们发现了一个新的信号通路,miR-205-5p/GGCT/CD44参与PTC的发生发展,在肿瘤转移过程中发挥重要作用。开发miR-205 模拟物或 GGCT 抑制剂都为 PTC 的综合治疗提供了新思路。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Nutritional Risk Index Predicts Survival in Patients With Breast Cancer Treated With Neoadjuvant Chemotherapy.
营养风险指数 (NRI) 预测接受新辅助化疗的乳腺癌患者的生存期
DOI:10.3389/fnut.2021.786742
发表时间:2021
期刊:Frontiers in nutrition
影响因子:5
作者:Chen L;Qi Y;Kong X;Su Z;Wang Z;Wang X;Du Y;Fang Y;Li X;Wang J
通讯作者:Wang J
CAR-T Cells Targeting TSHR Demonstrate Safety and Potent Preclinical Activity Against Differentiated Thyroid Cancer
靶向 TSHR 的 CAR-T 细胞显示出针对分化型甲状腺癌的安全性和有效的临床前活性
DOI:10.1210/clinem/dgab819
发表时间:2021-12-03
期刊:JOURNAL OF CLINICAL ENDOCRINOLOGY & METABOLISM
影响因子:5.8
作者:Li, Hanning;Zhou, Xiang;Li, Xingrui
通讯作者:Li, Xingrui
DOI:doi: 10.3389/fendo.2020.00392
发表时间:2020
期刊:Frontiers in Endocrinology
影响因子:5.2
作者:Hanning Li;Xingrui Li;Yaying Du;Zhifang Yang;Zhengtao Lv
通讯作者:Zhengtao Lv
TMEM158 May Serve as a Diagnostic Biomarker for Anaplastic Thyroid Carcinoma: An Integrated Bioinformatic Analysis
TMEM158 可作为甲状腺未分化癌的诊断生物标志物:综合生物信息学分析
DOI:10.1007/s11596-020-2296-8
发表时间:2020-12-01
期刊:CURRENT MEDICAL SCIENCE
影响因子:2.4
作者:Li, Han-ning;Du, Ya-ying;Li, Xing-rui
通讯作者:Li, Xing-rui
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