EB病毒EBERs和BARF1基因变异型参与鼻咽癌癌变的分子机制研究

EB病毒（EBV）编码小RNA（EBERs）和早期基因BARF1具有致癌作用，但其致癌机制尚不明了。我们前期对鼻咽癌（NPC）低发区EBV基因多态性研究中发现EBERs和BARF1变异型EB-8m和V29A在低发区样本中的检出率较低，但在NPC中的检出率高于健康人群。本研究对NPC高发区样本中EBERs和BARF1基因变异进行检测，并重点探讨变异型基因对其致癌潜能的影响及参与NPC癌变的分子机制。基因多态性检测显示EBERs基因EB-8m变异型及出现1处核苷酸突变的BARF1基因B95-8t42c变异型在高发区NPC中为主要型别，其在NPC高发区各人群中的检出率高于低发区相应人群，但两个地区NPC中的检出率均高于健康人群，提示EB-8m和B95-8t42c变异可能与NPC尤其是高发区NPC发生相关；BARF1 V29A变异型仅在少数高发区NPC中检出，且检出率与健康人群类似。细胞生物学实验表明BARF1 原型和V29A变异型基因过表达均可促进NPC细胞系增殖、提高其抗凋亡能力和迁移侵袭能力，从而增强细胞肿瘤原性，但V29A变异不影响其致癌潜能。表达谱芯片数据显示BARF1基因可影响多种肿瘤相关基因的表达，基因验证结果提示BARF1通过下调CDH1、GJA1和S100A2基因表达，下调TP63、miR205并上调ZEB2表达参与NPC癌变过程。与BARF1基因不同，EBERs基因EB-8m变异可增强其致癌潜能，其过表达可促进NPC细胞系增殖、迁移和侵袭，提高其抗凋亡和致瘤能力，导致NPC细胞恶性表型的增强。EB-8m主要影响转录调节、蛋白磷酸化、核酸代谢等相关基因的表达，可能通过上调FOS、HIF1A和CSEIL等肿瘤相关基因的表达参与NPC癌变过程。EBER2 EB2-8m变异可能通过影响其与RNA激活蛋白激酶PKR结合，抑制PKR磷酸化，增强NPC细胞的抗凋亡作用。本研究结果明确了EBERs和BARF1基因变异在NPC发生中的意义，并筛选和鉴定出EBERs变异型和BARF1基因参与NPC癌变的可能机制，对最终阐明EBV致癌机制提供理论和实验依据。