课题基金基金详情
辐射诱导的人鼻咽癌耐药细胞株(CNE1/R)中PECAM-1信号传导机制的研究
结题报告
批准号:
30970869
项目类别:
面上项目
资助金额:
25.0 万元
负责人:
王若雨
依托单位:
学科分类:
H1821.肿瘤治疗抵抗
结题年份:
2012
批准年份:
2009
项目状态:
已结题
项目参与者:
冀学宁、许雪珠、王福光、全秀莲、吕金燕、杨方、王慧、李雪霞
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
鼻咽癌是中国最常见的恶性肿瘤之一。目前放化联合治疗是其临床领域研究的热点。申请者前期研究证明照射能够引起人鼻咽癌CNE1细胞株产生多药耐药性。本项目利用新建立的高剂量辐射诱导稳定表达多药耐药基因的人鼻咽癌(CNE1/R)细胞株,采用基因芯片技术从CNE1/R中筛选出与辐射诱导多药耐药基因及其蛋白表达密切相关的新关键分子"PECAM-1",探讨其分子作用机制。近年来越来越多证据表明PECAM-1与肿瘤细胞的存活有着密切的关系,本项目在前期研究基础上利用siRNA技术、基因突变体构建和抗体阻断方法阻断PECAM-1信号传导通路,western blotting、免疫共沉淀等方法检测信号传导通路中关键分子的磷酸化状态和活性,进一步明确PECAM-1介导的CNE1/R细胞株促细胞存活的信号传导机制,为今后提高鼻咽癌治疗疗效,设计个体化治疗方案提供新的靶点和策略。
英文摘要
本科研项目基本按照计划进行,大体原则和方向不变。通过建立CNE1/R细胞系的培养与建立及基因芯片筛选;RT-PCR及Western blotting验证照射前、后CNE-1细胞MDR-1、P-gp及PECAM-1mRNA 及蛋白的表达情况;人鼻咽鳞癌细胞CNE1/R PECAM-1的基因克隆、序列分析及真核表达载体的构建;RNA干扰PECAM-1载体构建及筛选最好的一段siRNA序列;siRNA干扰PECAM-1对人鼻咽鳞癌辐射耐药细胞CNE1/R MDR-1表达的影响及建立pSilencer2.1-PECAM-1/CNE1/R细胞系并对其生物学特性研究。利用siRNA技术、RT-PCR、细胞凋亡等检测方法,进一步研究PECAM-1介导的CNE/R细胞株拮抗化学药物凋亡信号传导机制,选取了PECAM-1/PI3K/Akt/Bcl-2信号传导通路研究,为今后提高鼻咽癌治疗疗效,设计个体化治疗方案提供新的靶点和策略做理论基础。在RNA干扰技术筛选PECAM-1序列方面稍作改动,将瞬时转染细胞系,改为建立稳定干扰PECAM-1表达细胞系pSilencer2.1/CNE1/R和pSilencer2.1-PECAM-1/CNE1/R。分别对干扰PECAM-1表达后的CNE1/R细胞系及通过稳定转染至低表达PECAM-1的CNE1细胞使其高表达的细胞系进行了细胞生物学方面的深入研究,探讨PECAM-1与细胞增殖,凋亡,耐药性之间的关系,这是原课题中未涉及之处。此外,还深入对PECAM-1基因采取了生物信息学方面研究,人鼻咽鳞癌细胞CNE1/R PECAM1基因序列已被GenBank收录,GenBank Accession为JQ287500。. 本课题将继续在RNA干扰PECAM-1细胞后进行裸鼠成瘤实验,进一步探讨其基因在动物体内变化,此项也是原课题未涉及之处。本课题原计划研究两条信号通路,后因时间及试剂问题,只研究其中一条信号通路,并取得实验结果。其余实验项目整体与课题相符。. 本项目现已发表3篇中华核心论文及1篇SCI论文,因部分实验结果尚未统计及裸鼠成瘤实验正在进行,预计将继续发表2-3篇中文论文,争取再发1-2篇SCI论文,培养一名中青年学术带头人及8名硕士研究生。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:--
期刊:中华临床医师杂志(电子版)
影响因子:--
作者:李昕;蒋中秀;伦永志;王若雨
通讯作者:王若雨
DOI:--
发表时间:--
期刊:中华肿瘤防治杂志
影响因子:--
作者:宋学薇;皇婷;阙开乾;王若雨;王秀丽
通讯作者:王秀丽
DOI:--
发表时间:--
期刊:中华临床医师杂志(电子版)
影响因子:--
作者:蒋中秀;李昕;伦永志;王若雨
通讯作者:王若雨
DOI:10.3892/mmr.2012.1148
发表时间:2013-01-01
期刊:MOLECULAR MEDICINE REPORTS
影响因子:3.4
作者:Ji, Xue-Ning;Yang, Fang;Wang, Ruo-Yu
通讯作者:Wang, Ruo-Yu
m6A甲基化修饰调控LncRNA-H19介导鼻咽癌放射抵抗的机制研究
  • 批准号:
    82172822
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    王若雨
  • 依托单位:
国内基金
海外基金