睾丸间质细胞（LC）是雄性体内雄激素的最主要来源，其数量减少或激素合成通路受损都将导致雄性体内雄激素缺乏。LC的发育有四个显著不同的阶段：Leydig干细胞(SLC)、Leydig祖细胞（PLC）、未成熟型Leydig细胞（ILC）以及成熟型Leydig细胞（ALC）。为了研究细胞生长因子对SLC发育及激素合成的调控作用，我们首先建立了大鼠睾丸曲细精管体外培养模型，并利用乙烷二甲烷硫砜（EDS）诱导曲细精管表面的ALC发生凋亡后，加入不同种类的细胞生长因子（bFGF，NGF，IGF-1，EGF）进行处理。结果表明，1）EDS不会导致SLC发生凋亡；2）SLC在促黄体生成激素（LH）和胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸盐（ITS）的作用下，可以发育成具合成和分泌睾酮的ALC；3）再生ALC可以在曲细精管上长时间存活；4）四种因子均能以浓度依赖模式显著促进SLC的增殖。其中，bFGF的最佳作用浓度分别为10 ng/ml，而其余3种均为100 ng/ml。利用荧光定量PCR技术分析雄激素合成通路各种酶mRNA表达情况，结果显示，四种因子均能促进SLC向PLC阶段分化，并最终发育成能合成和分泌睾酮的ALC。因此，曲细精管体外培养模型可成为调控SLC分化发育的高通量药物筛选平台。.　　在此基础上，我们筛选bFGF及IGF-1进行动物实验。EDS同样可以诱导睾丸ALC发生凋亡，并导致大鼠体内血清睾酮迅速降低。再生LC的整个发育过程及激素合成基因的表达水平与青春期LC的相当。与对照组相比，bFGF及IGF-I都能显著增加EDS处理大鼠睾丸的重量及提升血清睾酮含量。这个结果表明，在体内，两种因子也能促进SLC的增殖和发育。抑制剂PD166866对bFGF及IGF-I促LC细胞增殖有显著的抑制作用，说明bFGF及IGF-I对LC的促增殖和分化主要通过IGF-I信号通路实现的。从睾酮合成酶mRNA表达水平及血清睾酮含量变化趋势的结果提示，bFGF及IGF-1能加快SLC向PLC及ILC阶段发育，但对ALC则没有作用。.　　本项目共获得资助人民币32万元，并完全按照合同书要求使用；参加了2次国内外学术会议并提交会议摘要；发表学术论文5篇，其中SCI收录论文4篇；培养博士研究生1名，硕士研究生3名；培养团队人员获得高级职称3人，中级职称1人；本人还获得广东省高等学校特聘教授“珠江学者”资助。