水通道蛋白5在唾液分泌中作用机制的研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    81100765
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    22.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    H1505.唾液、唾液腺及口腔颌面脉管神经及颌骨良性疾病
  • 结题年份:
    2014
  • 批准年份:
    2011
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

唾液在维持口腔和全身健康中发挥了重要的作用。水是唾液的主要成分,水通道蛋白5(AQP5)在唾液的水分泌过程中发挥了关键的作用。然而,关于其作用机制的研究存在争议。本项目前期工作证明唾液腺中AQP5存在单体和结合体两种形式,二硫键在二者的转换中发挥重要作用。在此基础上我们进一步提出AQP5从结合状态向单体转化来参与唾液水分泌的假说。本课题拟用成年SD大鼠的颌下腺,采用免疫印迹、质谱分析、免疫荧光等技术检测AQP5单体和结合体相互转化的机制及其与唾液分泌之间的关系。采用基因突变和转染技术检测与AQP5结合的蛋白以及结合的氨基酸位点。采用AQP5野生/突变子重组腺病毒转染唾液腺腺泡细胞系及大鼠颌下腺器官,检测其对唾液水分泌的影响,验证AQP5可能作用机制。本课题将为进一步阐明唾液水分泌机制提供新认识,为唾液分泌障碍疾病的预防诊断和人工干预提供新见解。

结项摘要

实验进度基本按照年度计划进行,并完成大部分设计实验。.本项目的研究工作第一次揭示MTA复合体释放AQP5单体对于唾液水分泌功能的调控作用:在唾液腺静息状态下AQP5大部分通过TRPV4与细胞骨架(F-actin)结合,形成MTA(Microfilament-TRPV4-AQP5)复合体(AQP5失能状态);在分泌状态下MTA复合体游离AQP5单体(AQP5功能活化),对水分子发挥快速跨膜转运功能,调控唾液水分泌。.研究了可能参与MTA复合体形成的AQP5氨基酸序列中的半胱氨酸位点:145位和182位的半胱氨酸可能参与MTA复合体的形成,同时这两个位点在AQP5分子内也可形成二硫键,我们推测这一结构在维持AQP5水特异性孔道空间结构中的发挥作用。.检测了AQP5和PDI家族中PDI、ERP57、ERP72在大鼠颌下腺组织中的共定位,发现ERP72和PDI可能参与AQP5中二硫键的异构,其中ERP72 可能与AQP5单体的释放相关。.本研究丰富对颌下腺分泌调控机制的认识,为唾液水分泌生理以及病理研究提供了新的靶点,具有潜在临床应用价值。.以下为一小部分未能按照实验计划进行的具体试验内容:虽然在本实验结果中我们发现在大鼠颌下腺中PDI和MTA复合体存在共定位,但是在HEK293细胞中并没有观察到二者存在共定位。推测其原因可能是:器官源性差异 — 可能在肾脏和颌下腺这两个器官中存在PDI的分布差异。这一部分实验拟在颌下腺来源的细胞中进行体外实验。.依据本研究的实验结果,我们已完成一篇英文论文的撰写和修改,并完成1篇论文的数据的收集。

项目成果

期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)

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其他文献

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AI技术路线图

丁谦文的其他基金

微丝-瞬时感受电位香草精受体4-水通道蛋白5复合体与水通道蛋白5转换对唾液水分泌的调控机制的研究
  • 批准号:
    81570990
  • 批准年份:
    2015
  • 资助金额:
    57.0 万元
  • 项目类别:
    面上项目

相似国自然基金

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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