鸡脂肪组织和骨骼肌miRNA的筛选、表达和功能研究

miRNA是一类新发现的长度大约为22nt的非编码小RNA，其通过作用于靶基因mRNA的3'-UTR区，抑制靶基因mRNA翻译或者引起靶基因mRNA降解。miRNA的识别及其功能分析是当前分子生物学研究的热点。本研究通过构建肉鸡脂肪和骨骼肌小RNA的cDNA文库，测序后用生物信息学方法分析其前体的二级结构，判定其是否为miRNA；采用RPA方法检测miRNA在鸡不同组织中的表达，根据不同组织表达结果进一步检测其在鸡的不同生长发育阶段脂肪组织和肌肉中的表达情况；利用软件进行鸡的蛋白基因3'-UTR序列与miRNA配对比较，初步判定miRNA作用的可能靶基因；构建含有荧光素酶报告基因并下游连接可能靶基因3'-UTR的表达载体，与miRNA体外共转染细胞分析miRNA的功能。从而通过对鸡脂肪组织和骨骼肌miRNA的识别、表达和功能研究，从另一角度探讨肉鸡脂肪和肌肉生长发育调控的分子机理。