课题基金基金详情
抑制变形链球菌Sortase A酶预防龋病的应用基础研究
结题报告
批准号:
81000426
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
胡萍
依托单位:
学科分类:
H1503.牙体牙髓及根尖周组织疾病
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
皮慧芳、马净植、罗增伟、白宇明、颜妮、张威
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中文摘要
变形链球菌是人类龋病的主要致病菌,细胞膜内的sortase A酶催化具有sorting信号的表面蛋白连接到细胞壁上。变形链球菌表面蛋白Pac、GbpC不仅是具有sorting信号的表面蛋白,还是粘附毒力因子,它们帮助变形链球菌附着在牙面,形成制龋性菌斑。本研究在提纯了变形链球菌Sortase A酶,并构建荧光分光光度计检测Sortase A酶活力的反应体系的基础上,筛选出在MIC值内具有抑制变形链球菌Sortase A酶活性的抑制剂,并通过对抑制剂进行衍生物的设计与合成将其优化。优化后的抑制剂能在不影响变形链球菌生长活性的前提下,通过抑制变形链球菌sortase A酶而减少其表面粘附毒力因子,从而降低细菌致龋性菌斑的形成,预防龋病的发生。长期使用该抑制剂防龋,变形链球菌不会产生耐药性,为龋病预防提供了新的思路。
英文摘要
变形链球菌是人类龋病的主要致病菌,细胞膜内的sortase A酶催化具有sorting信号的表面蛋白连接到细胞壁上。变形链球菌表面蛋白Pac不仅是具有sorting信号的表面蛋白,还是粘附毒力因子,他们帮助变形链球菌粘附在牙面,形成致龋性菌斑,因此sortase A酶是与变形链球菌致龋性生物膜形成密切相关的毒力因子。本研究提纯了变形链球菌sortase A酶,并构建了荧光光度计检测sortase A酶活力的反应体系,测出姜黄素和桑色素的IC50值分别10.2±0.7和6.7±1.1。.同时采用肉汤稀释法测得姜黄素和桑色素对变形链球菌的MIC值分别为175µM和575µM。筛选出的姜黄素和桑色素是能在MIC值内抑制变形链球菌sortase A酶活性的抑制剂。免疫印迹实验发现15µM姜黄素和30µM桑色素使变形链球菌表面的粘附毒力因子Pac蛋白落入到培养基中,提示姜黄素和桑色素能在不干扰变形链球菌生长的前提下,通过抑制sortase A酶而使得变形链球菌表面粘附因子蛋白Pac较少。变形链球菌细菌表面的粘附毒力因子Pac减少,从而影响到变形链球菌的粘附能力。在后续的生物膜形成实验中15µM姜黄素和30µM桑色素均能有效减少主要致龋菌变形链球菌生物膜的形成,为安全有效的防治龋病提供了新的思路和方法。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:10.1007/s00284-013-0439-x
发表时间:2014-01-01
期刊:CURRENT MICROBIOLOGY
影响因子:2.6
作者:Huang, Ping;Hu, Ping;Chen, Wei Min
通讯作者:Chen, Wei Min
DOI:10.1002/cbin.10050
发表时间:2013-05-01
期刊:CELL BIOLOGY INTERNATIONAL
影响因子:3.9
作者:Hu, Ping;Huang, Ping;Chen, Min Wei
通讯作者:Chen, Min Wei
DOI:--
发表时间:2013
期刊:Cell Biology International
影响因子:--
作者:胡萍;黄平;陈卫民;
通讯作者:
DOI:--
发表时间:2013
期刊:口腔临床医学杂志
影响因子:--
作者:张碧楚;黄平;胡萍;陈卫民
通讯作者:陈卫民
Curcumin reduces Streptococcus mutans biofilm formation by inhibiting sortase A activity
姜黄素通过抑制分选酶 A 活性来减少变形链球菌生物膜的形成。
DOI:10.1016/j.archoralbio.2013.05.004
发表时间:2013-10-01
期刊:ARCHIVES OF ORAL BIOLOGY
影响因子:3
作者:Hu, Ping;Huang, Ping;Chen, Min Wei
通讯作者:Chen, Min Wei
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