Tn917随机插入诱变法寻找S.suis2强毒株黏附基因的研究

S.suis2对宿主组织细胞的黏附作用与其在侵袭门户组织的定植、体内的扩散和感染靶组织的偏嗜性密切相关，是探讨致病机理的切入点，但目前还没有对国内流行的强致病菌株的黏附性进行研究的报导。本项目拟采用Tn917转座子随机插入法，对S.suis 2型强毒株05ZY/H33的染色体进行诱变，产生变异体；然后根据S.suis 2型致病菌在体外可以黏附到脑微脉管内皮细胞（BMEC）的特性，用ELISA方法筛选黏附性下降或丢失的缺陷株；根据紧邻Tn917融合位点下游的DNA序列设计合成引物，对缺陷株中转座子插入位点侧翼序列进行克隆和测序，并与已完成测序的05ZY/H33株基因组序列进行比对，找到失活的目标基因，在染色体上定位并分析其编码蛋白的结构和功能；最后通过基因敲除试验和动物试验证实所获得目标基因的功能。本项研究的结果对黏附机制和致病机理的认识、对靶分子疫苗和靶药物的研制均有指导意义。