miR-134/LIN28A介导NF-κB信号通路研究肝纤维化机制及狗肝菜多糖(DCP)干预
批准号:
81760114
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
张可锋
依托单位:
学科分类:
H0310.肝损伤、修复与再生
结题年份:
2021
批准年份:
2017
项目状态:
已结题
项目参与者:
张琳、曹后康、黄思茂、蒋志敏、周云、钟明利、高雅、曾峥
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中文摘要
课题组前期研究证实DCP具有显著保肝和抗HF作用,在HF大鼠中发现,miR-134表达下降,而LIN28、NF-κB及下游基因TNF-α、IL-6等大量表达,DCP可调控以上指标改善HF。NF-κB是肝脏炎症反应的中心环节,LIN28A和miRNA 均可介导NF-κB调控肝脏炎症,且LIN28A与miRNA存在交互关系。因此,推测miRNA-134和LIN28A可能存在交互作用,并介导 NF-κB通路调控HF进程。为此,本研究通过体内外实验,应用siRNA、慢病毒载体、荧光素酶报告基因、免疫共沉淀及miR-134-/-、LIN28A-/-和NF-κB-/-基因敲除小鼠等方法,明确miR-134与LIN28A是否为防治HF的新靶标及二者的交互关系,以及二者能否、如何调控NF-κB通路,同时揭示DCP是否通过miR-134/LIN28A介导NF-κB通路抗HF,为防治HF提供新靶标和潜在药物。
英文摘要
Research group found that Dicliptera chinensis polysaccharides(DCP) had a great hepatoprotective and anti-fibrotic effect. The expression of miR-134 decreased, but the level of LIN28、NF-κB and downstream target genes TNF-α and IL-6 increased significantly, and DCP could regulate above indexes to anti-HF in rats with hepatic fibrosis(HF).NF-κB, which can be transcribed by LIN28A or miRNA, runs through the inflammatory response of liver. LIN28A interacts with miRNA.Therefore, there is likely to be an interactive relationship between miRNA-134 and LIN28A, which participate in HF by regulating NF-κB pathway.For this purpose, the current study apply siRNA, lentiviral vector, luciferase reporter gene assay, immunoprecipitation, miR-134-/-、 LIN28A-/- and NF-κB-/- knocked out mice et al to demonstrate whether miRNA-134 and LIN28A are new targets for prevention and treatment of HF and interact, and whether or how they control NF-κB pathway, and meanwhile to reveal whether DCP counteracts HF via miR-134/LIN28A - NF-κB pathway and provide new targets and potential drugs for prevention and treatment of HF.
本项目旨在研究狗肝菜多糖(DCP)是否作用于miR-134介导的MAPK、NF-κB和LIN28A信号通路,寻找潜在的缓解肝纤维化(HF)的新方法。我们使用2,4-二甲基亚硝胺(DMN)和TGF-β1分别诱导大鼠和HSC-T6细胞建立HF体内外模型。肉眼观察取材大鼠肝脏,模型组肝脏呈暗红色和灰白色相间,表面粗糙,质地较硬且边缘变厚;DCP给药组肝脏病变程度较模型组均有改善。肝脏切片经HE、MASSON染色观察,模型组大鼠肝小叶结构被破坏,肝细胞排列分布紊乱,出现大量蓝色胶原纤维沉积,被沉积的胶原纤维分割成大小不等的假小叶,出现大量炎性细胞浸润和肝细胞坏死;与模型组相比,DCP给药组受损的肝小叶结构减轻,亦有不同程度的胶原纤维沉积,炎性细胞浸润减少。免疫组化结果发现模型组大鼠肝组织中TGF-β1、α-SMA表达较对照组增加,而DCP给药组肝组织中TGF-β1、α-SMA表达较模型组明显降低。RT-PCR结果显示在模型组中miR-134的表达显著上调,而DCP给药组中的表达均有不同程度的降低。通过检测ALT、AST、ALP、TBIL、HA、LN、PC-III、IV-C、TGF-β1和α-SMA的活性或含量,证实DCP对肝纤维具有确切药效。WesternBolt结果显示,DCP可抑制α-SMA、TGF-β1、LIN28A、NF-κBp65、MMP9、COX-2、iNOS、ERK、JNK和p38等蛋白表达,表明其可干预MAPK、NF-κB和LIN28A信号通路的激活。通过ELISA、RT-PCR检测发现下游炎症相关因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低,表明DCP可减轻炎症反应。总之,DCP通过抑制miR-134的表达,进一步抑制MAPK、NF-κB和LIN28A信号通路的激活从而缓解HF。.此外我们制备了免疫性肝损伤和非酒精脂肪肝模型,研究DCP对此两种病理模型的保护作用和作用机制。结果显示DCP能显著抑制Fas/FasL配体系统及凋亡相关蛋白和mRNA的表达,从而减少细胞凋亡,达到治疗免疫性肝损伤的效果。DCP对非酒精脂肪肝的保护作用可通过调控TLR-4/NF-κB炎症通路和AMPK/Nrf2氧化应激通路调节糖脂代谢和氧化应激,改善NAFLD。综上研究成果发表研究性论文10篇,其中6篇SCI和4篇北大核心期刊;获授权发明专利1件。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Marchantia polymorpha L. Flavonoids Protect Liver From CCl4-Induced Injury by Antioxidant and Gene-Regulatory Effects
地钱黄酮类化合物通过抗氧化和基因调节作用保护肝脏免受 CCl4 引起的损伤
DOI:--
发表时间:2020
期刊:Altern Ther Health Med
影响因子:--
作者:Zhang KeFeng;Cao HouKang;Wei RiMing;Jin Ling
通讯作者:Jin Ling
Effects of taraxasterol against ethanol and high-fat diet-induced liver injury by regulating TLR4/MyD88/NF-κB and Nrf2/HO-1 signaling pathways
蒲公英甾醇通过调节TLR4/MyD88/NF-kappa B和Nrf2/HO-1信号通路对抗乙醇和高脂饮食引起的肝损伤
DOI:10.1016/j.lfs.2020.118546
发表时间:2020-12-01
期刊:LIFE SCIENCES
影响因子:6.1
作者:Li, Zimeng;Lian, Yuanyu;Zhang, Kefeng
通讯作者:Zhang, Kefeng
Study on the protective effect and mechanism of Dicliptera chinensis (L.) Juss (Acanthaceae) polysaccharide on immune liver injury induced by LPS
棘科双翅目多糖对脂多糖所致免疫性肝损伤的保护作用及机制研究
DOI:10.1016/j.biopha.2020.111159
发表时间:2021
期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy
影响因子:7.5
作者:Xu Qiongmei;Xu Jie;Zhang Kefeng;Zhong Mingli;Cao Houkang;Wei Riming;Jin Ling;Gao Ya
通讯作者:Gao Ya
DOI:--
发表时间:2019
期刊:天然产物研究与开发
影响因子:--
作者:张可锋;高雅;曹后康;钟明利;晋玲
通讯作者:晋玲
DOI:10.16333/j.1001-6880.2021.3.005
发表时间:2021-03
期刊:天然产物研究与开发
影响因子:--
作者:郑董璇;张可锋;晋玲;钟明利;赵唐莲;曹后康;段小群;高雅
通讯作者:高雅
壮药狗肝菜多糖(DCP)靶向miR-9调控AMPK/Nrf2信号通路改善肝脏糖脂代谢紊乱的作用机制研究
- 批准号:82160811
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:34万元
- 批准年份:2021
- 负责人:张可锋
- 依托单位:
壮药狗肝菜多糖(DCP)对肝纤维化TGF-β1/smad与p38MAPK信号通路的干预作用及其分子机制研究
- 批准号:81360685
- 项目类别:地区科学基金项目
- 资助金额:49.0万元
- 批准年份:2013
- 负责人:张可锋
- 依托单位:
国内基金
海外基金















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