低浓度紫杉醇诱导KM12C细胞中血管新生抑制因子凝血酶敏感蛋白-1表达的分子机制

紫杉醇目前已广泛用于卵巢癌、乳腺癌、肺癌、食道癌和胃癌等的治疗。紫杉醇主要抗癌机理是抑制微管解聚作用从而导致肿瘤细胞的死亡。它作为化疗药物毒副作用仍然很大，尤其是对正在处于分裂的正常细胞损伤严重。另外，其抗癌机制因浓度和癌细胞类型的不同而存在差异。因此，有必要对IC50及其以下浓度的紫杉醇对结肠癌细胞的作用效果及其机制进行研究。在本研究中我们用接近IC50及其以下浓度的紫杉醇处理结肠癌LOVO和HCT-116细胞后对细胞敏感性、细胞形态和细胞周期的影响并对其机制进行探索性研究。得出的实验结果如下：1.紫杉醇处理HCT116细胞和LOVO细胞后，它们的半数致死剂量分别为2.46nM和2.24nM ；2. 1nM和3nM的紫杉醇处理后两细胞的形态发生了改变。与对照相比，随着处理紫杉醇的浓度增加两株细胞收缩呈圆形、破碎和增殖停滞。但是，紫杉醇的处理浓度小于1nM时对细胞的形态没有影响；3. 1nM 的紫杉醇处理两株细胞后，细胞的Sub-G1 期增加， G0/G1 期减少，而S 和G2/M几乎没有发生变化。但是，紫杉醇的处理浓度小于1nM时对细胞周期没有影响；4. 在结肠癌LOVO细胞中，与对照相比，紫杉醇浓度依存性地减少了细胞中c-Myc mRNA和全蛋白中c-Myc蛋白的表达水平。然而，与对照相比紫杉醇处理紫杉醇处理增加了全蛋白中P-c-Myc的表达水平；5. 在结肠癌HCT116细胞中，与对照相比，紫杉醇浓度依存性地减少了全蛋白中c-Myc蛋白的表达水平。细胞核中c-Myc表达水平也随紫杉醇浓度的增加而降低。P-c-Myc核蛋白在HCT-116细胞中随紫杉醇浓度的增加而降低；6.在两株结肠癌细胞以及正常的人肠道上皮IEC6细胞中，与对照相比，上述浓度紫杉醇处理对的微管结构的主要蛋白ɑ-Tubulin和β-Tubulin表达水平都没有影响。综上所述，我们的研究结果提示在结肠癌细胞中，IC50浓度的紫杉醇下调c-Myc 和P-c-Myc以一种不知明的通路导致细胞周期G0/G1阻滞。它可能涉及到改变胞周期相关蛋白的活性；IC20浓度的紫杉醇（小于1nM）时，不能诱发结肠癌细胞周期抑制和没有明显的细胞形态改变，但是依然能够抑制结肠癌细胞的活力。本研究为今后研究和开发利用低浓度的紫杉醇治疗结肠癌和其它癌症提供实验依据和理论基础。