课题基金基金详情
儿童侵袭性CA-MRSA ST59克隆PSMα毒力因子对Hlα调控机制的研究
结题报告
批准号:
81571948
项目类别:
面上项目
资助金额:
60.0 万元
负责人:
钱素云
依托单位:
学科分类:
H1601.脓毒症
结题年份:
2019
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
王丽娟、刘颖超、王荃、许宏、何乐健、李科纯、郭艳霞
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)在我国儿童侵袭性MRSA感染中逐渐增多。ST59克隆是我国儿童CA-MRSA的主要流行克隆,目前其毒力增强的确切机制尚不清楚。研究发现受Agr调控系统调节的酚溶调制肽(PSMα)和a-溶血素(Hla)与其毒力增加有密切关系,且近期发现PSMα、Hla两种毒力因子间具有协同作用。我们前期发现我国儿童ST59克隆携带特定毒素基因,包括psmα和hla基因。本课题拟对我国儿童ST59克隆代表株中PSMα对Hla调控的可能机制进行研究。通过对相关基因进行敲除及增强表达,将相应菌株接种于皮肤软组织脓肿、肺炎、菌血症实验动物模型,比较其致病力,同时利用人类中性粒细胞溶解实验分析其抵抗宿主固有防御能力,分析PSMα、Hla、agrA三者间相关性;试明确PSMα是通过AgrA通路对Hla产生影响,探讨ST59克隆毒力因子PSMα、Hla相互影响机制。
英文摘要
The exact pathogenesis of invasive community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus (CA-MRSA) enhanced virulence is unclear, previous research reported that it was strongly associated with the increased expression of virulence determinants: α-helical phenol-soluble modulin (PSMα) and alpha-toxin(Hla). Regional differences exist in the distribution of CA-MRSA clones,and the virulence varies with different clonal lineages. We previously found that the most predominant sequence type(ST)of CA-MRSA was ST59 in Chinese children, which harbored virulence genes above. This study is focus on PSMα regulates Hla produttion through global regulatory genes agr. We compare their expression to their deletions to confirm the differential expression of virulence determinants in skin and soft tissue infection, pneumonia, bacteriaemia animal models. And then we can elucidate α-helical phenol-soluble modulin regulates alpha-toxin produttion through global regulatory factor AgrA and discuss the basis for research in clinical prevention and diagnosis.
社区相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)在我国儿童MRSA感染中逐渐增多。研究发现受附属基因调节系统(agr系统)调节的酚溶调制肽(PSMα)和α-溶血素(Hlα)与其毒力增加密切相关,且近期发现psmα对hlα具有调控作用。本课题拟研究我国儿童MRSA临床分离株分子分型及耐药性特征及变迁,并筛选出CA-MRSA主要流行克隆代表株,对psmα、hlα、agr进行敲除并对psmα、hlα进行增强表达,进而采用高通量转录组测序研究psmα基因敲除对菌株整体转录组的影响,深入研究其对hlα调控作用的可能机制,最后通过红细胞溶解实验及皮肤软组织感染、菌血症动物模型研究相关毒力基因对菌株致病力的影响。主要研究结果如下:(1)MRSA临床分离株具有较高同源性,生物膜形成能力强、多重耐药率高的ST59-SCCmec IV-t437-agr I克隆为HA-MRSA和CA-MRSA主要流行克隆;传统HA-MRSA ST239-SCCmec III分离株逐渐减少且对多种抗生素耐药性下降,CA-MRSA的优势克隆和耐药性在2010-2017年保持稳定;MRSA对万古霉素MIC值出现爬升。(2)psmα敲除可使ST59-SCCmec IV克隆的转录组发生变化,筛选出差异基因27个(上调13个,下调14个),差异基因涉及多种生物学过程及信号通路。(3)对psmα、hlα、agr基因修饰未影响菌株的生长状况;psmα敲除后,RNAIII(agr系统主要效应分子)表达下降,hlα转录和翻译水平均下降;agr敲除后,psmα基本不表达,hlα表达下降;hlα敲除后,psmα表达下降,RNAIII转录水平无显著变化;hlα过表达后,RNAIII和psmα转录水平均增加;通过红细胞溶解实验及感染动物模型显示,psmα、hlα、agr敲除株的致病力明显降低,hlα过表达后菌株的致病力显著增强。以上结果表明生物膜形成能力强、多重耐药率高的ST59-SCCmec IV-t437-agr I克隆已成为我国儿童MRSA的主要流行克隆,psmα参与调控MRSA ST59克隆多种生物学过程及信号通路,psmα可通过反向作用于agr系统调控hlα基因的表达。该研究加深了人们对我国儿童金葡菌临床分离株分子特征、耐药性及毒力调控系统的认识,为金葡菌感染的防控及新型抗感染药物的研发提供理论依据。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:10.1002/ped4.12129
发表时间:2019
期刊:Pediatric Investigation
影响因子:2.2
作者:Xin Yang;Yingchao Liu;Lijuan Wang;Suyun Qian;Kaihu Yao;Fang Dong;Wenqi Song;Hong Xu;Jinghui Zhen;Wei Zhou
通讯作者:Wei Zhou
DOI:--
发表时间:--
期刊:中华实用儿科临床杂志
影响因子:--
作者:孔黎明;杨鑫;钱素云;董方;刘颖超;王丽娟;姚开虎;宋文琪
通讯作者:宋文琪
DOI:--
发表时间:2019
期刊:中国小儿急救医学
影响因子:--
作者:孙琛;王亚娟;杨鑫;钱素云
通讯作者:钱素云
DOI:10.1007/s12519-019-00317-4
发表时间:2019-10
期刊:World Journal of Pediatrics
影响因子:8.7
作者:Chen Sun;Qing Wang;Wen‑Ting Li;De‑Nian Wen;Chang‑Hui Chen;Xin Yang;Wei Shi;Qing‑Hong Meng;Kai‑Hu Yao;Su‑Yun Qian
通讯作者:Su‑Yun Qian
Multiresistant ST59-SCCmec IV-t437 clone with strong biofilm-forming capacity was identified predominantly in MRSA isolated from Chinese children.
具有强生物膜形成能力的多重耐药 ST59-SCCmec IV-t437 克隆主要在从中国儿童分离的 MRSA 中被鉴定出
DOI:10.1186/s12879-017-2833-7
发表时间:2017-11-25
期刊:BMC infectious diseases
影响因子:3.7
作者:Yang X;Qian S;Yao K;Wang L;Liu Y;Dong F;Song W;Zhen J;Zhou W;Xu H;Zheng H;Li W
通讯作者:Li W
国内基金
海外基金