利用体细胞基因打靶突变技术制作CETP基因敲除家兔模型研究
批准号:
81070250
项目类别:
面上项目
资助金额:
33.0 万元
负责人:
刘恩岐
依托单位:
学科分类:
H0214.动脉粥样硬化与动脉硬化
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
范江霖、赵四海、杨鹏辉、余琦、朱虹、陈正兰、李亚峰、王艳丽、魏科娜
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中文摘要
心血管疾病(CVD)是引起人类死亡最常见疾病,胆固醇酯转移蛋白(CETP)通过调节高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)代谢而在CVD形成和发展中起重要作用。家兔模型研究人类CVD具有独特优势,目前不能通过胚胎干细胞基因打靶突变途径培育基因敲除(KO)家兔模型。本课题拟构建家兔CETP基因3~6外显子缺失的突变载体,采用体细胞基因打靶突变技术,将突变的CETP基因导入到家兔成纤维细胞,筛选出CETP KO (CETP+/-)成纤维细胞系。通过核移植技术,将CETP+/-成纤维细胞移植到去掉核的家兔卵母细胞中,得到CETP+/-家兔胚胎。实施胚胎移植获得CETP+/-克隆家兔。杂交后培育成功纯合CETP KO(CETP-/-)家兔模型。初步观察CETP KO家兔生长发育、血脂、脂蛋白谱等其他生物学特征,为研究CETP及其抑制剂在CVD形成和发展中作用、预防和治疗人类相关疾病提供新型动物模型。
英文摘要
心血管疾病(CVD)是引起人类死亡最常见疾病,胆固醇酯转移蛋白(CETP)通过调节高密度脂蛋白胆固醇代谢而在CVD 形成和发展中起重要作用。在本研究中(1)课题组克隆了家兔CETP基因、研究CETP在家兔各个组织的表达情况,比较分析了不同物种家兔CETP,发现家兔CETP主要在肝脏中表达、和豚鼠、地鼠等实验动物相比,家兔更适合探究人类CETP;我们发现高胆固醇血症家兔肝脏、血浆CETP和家兔动脉粥样硬化受伤存在某种关联。(2)制作成功家兔肝脏特异性表达人类CETP的转基因家兔,该模型家兔血浆CETP水平明显提高、活性显著增强。(3)调整实验策略,利用TALEN技术,作为家兔CETP体细胞打靶突变的补充,实施新打靶性方案。构建、筛选了高效TALEN真核表达质粒,转录为RNA,进行受精卵胞浆显微注射,已经获得第一代仔兔,正在进行基因型鉴定。后续将重点研究CETP在CVD 形成和发展中作用,为预防和治疗人类相关疾病提供帮助。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2012
期刊:西安交通大学学报(医学版)
影响因子:--
作者:赵四海;朱虹;陈宏列;白亮;成大欣;范江霖;刘恩岐
通讯作者:刘恩岐
Expression systems and species used for transgenic animal bioreactors.
用于转基因动物生物反应器的表达系统和物种
DOI:10.1155/2013/580463
发表时间:2013
期刊:BioMed research international
影响因子:--
作者:Wang Y;Zhao S;Bai L;Fan J;Liu E
通讯作者:Liu E
Expression of TRPV1 in rabbits and consuming hot pepper affects its body weight
家兔TRPV1表达及食用辣椒对其体重的影响
DOI:10.1007/s11033-012-1592-1
发表时间:2012-07-01
期刊:MOLECULAR BIOLOGY REPORTS
影响因子:2.8
作者:Yu, Qi;Wang, Yanli;Liu, Enqi
通讯作者:Liu, Enqi
High-dose rosiglitazone is pro-atherogenic in cholesterol-fed rabbits Rosiglitazone
高剂量罗格列酮对胆固醇喂养的兔子有促动脉粥样硬化作用 罗格列酮
DOI:--
发表时间:2012
期刊:Atherosclerosis
影响因子:5.3
作者:Wang, Yanli;Cheng, Fang;Chen, Yulong;Li, Yafen;Zhao, Sihai;Yu, Qi;Fana, Jianglin;Liu, Enqi
通讯作者:Liu, Enqi
Probucol and cilostazol exert a combinatorial anti-atherogenic effect in cholesterol-fed rabbits
普罗布考和西洛他唑对胆固醇喂养的兔子发挥联合抗动脉粥样硬化作用。
DOI:10.1016/j.thromres.2013.09.007
发表时间:2013-11-01
期刊:THROMBOSIS RESEARCH
影响因子:7.5
作者:Chen, Yulong;Zhao, Sihai;Liu, Enqi
通讯作者:Liu, Enqi
SETD2/H3K36me3通过TFEC介导巨噬细胞极化抑制动脉粥样硬化分子机制研究
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55万元
- 批准年份:2022
- 负责人:刘恩岐
- 依托单位:
内皮酯酶在动脉粥样硬化发生和发展中作用研究
- 批准号:81270348
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:75.0万元
- 批准年份:2012
- 负责人:刘恩岐
- 依托单位:
利用转基因家兔模型研究VEGF在肾小球病变中作用
- 批准号:30740002
- 项目类别:专项基金项目
- 资助金额:10.0万元
- 批准年份:2007
- 负责人:刘恩岐
- 依托单位:
国内基金
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