利用体细胞基因打靶突变技术制作CETP基因敲除家兔模型研究

心血管疾病（CVD）是引起人类死亡最常见疾病，胆固醇酯转移蛋白（CETP）通过调节高密度脂蛋白胆固醇代谢而在CVD 形成和发展中起重要作用。在本研究中（1）课题组克隆了家兔CETP基因、研究CETP在家兔各个组织的表达情况，比较分析了不同物种家兔CETP，发现家兔CETP主要在肝脏中表达、和豚鼠、地鼠等实验动物相比，家兔更适合探究人类CETP；我们发现高胆固醇血症家兔肝脏、血浆CETP和家兔动脉粥样硬化受伤存在某种关联。（2）制作成功家兔肝脏特异性表达人类CETP的转基因家兔，该模型家兔血浆CETP水平明显提高、活性显著增强。（3）调整实验策略，利用TALEN技术，作为家兔CETP体细胞打靶突变的补充，实施新打靶性方案。构建、筛选了高效TALEN真核表达质粒，转录为RNA，进行受精卵胞浆显微注射，已经获得第一代仔兔，正在进行基因型鉴定。后续将重点研究CETP在CVD 形成和发展中作用，为预防和治疗人类相关疾病提供帮助。