第二代杀虫蛋白Vip3Aa的功能分析及其杀虫机理研究

第二代杀虫蛋白Vip3Aa具有广谱杀虫活性，尤其对一些Cry蛋白不敏感的夜蛾类害虫（如甜菜夜蛾）有特效。Vip3Aa的杀虫机理还未明确，它能否诱导敏感昆虫的中肠细胞发生细胞凋亡仍无定论。Vip3Aa最小毒性片断尚未界定，也不清楚Vip3Aa与敏感昆虫中肠上皮膜上特异受体结合的"结合域"以及在中肠上皮膜上形成"穿孔"的"跨膜区"的位置。本项目拟采用缺失突变的方法，确定Vip3Aa的最小毒性片断；精确定位其"结合域"以及"跨膜区"；应用定点突变技术研究结构域内单个或多个氨基酸突变与Vip3Aa与受体结合能力、形成穿孔能力以及毒力的关系；应用透射电镜技术和细胞组化技术明确Vip3Aa是否能诱导甜菜夜蛾中肠上皮细胞发生凋亡。本项目为进一步揭示Vip3Aa的结构和功能，阐明其杀虫机理提供新的科学依据；为充分利用Vip3Aa，治理以甜菜夜蛾为代表的夜蛾科害虫，延缓Bt的抗性问题提供了新的思路和途径。