N277A单点突变增强SIV包膜蛋白诱导ADCC反应的机制研究

批准号:
81701636
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
唐娴
依托单位:
学科分类:
H1111.疫苗和免疫预防
结题年份:
2020
批准年份:
2017
项目状态:
已结题
项目参与者:
郭佳、王辉、张路坤、蒋强、王子乔、杜飞嫦
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
微信扫码咨询
中文摘要
艾滋病毒具有多种免疫逃逸机制,目前尚无免疫原能诱导出高水平的保护性体液免疫反应。HIV/SIV感染后,其包膜蛋白(Env)的CD4诱导性(CD4i)表位引发宿主产生大量CD4i抗体,但这些抗体并无保护作用。我们发现,与野生型SIV Env相比,N277A突变体在小鼠体内诱导的CD4i抗体显著减少,而诱导的ADCC反应显著增强。进一步分析显示,免疫血清的ADCC活性与CD4i抗体滴度呈负相关。由此我们提出假说:N277A突变破坏了SIV Env上具有免疫优势的CD4i表位,引导B细胞转而识别相对劣势的ADCC表位,从而增强Env诱导ADCC反应的能力。本课题拟采用酵母表面展示技术及ELISA和流式细胞术等方法,回答SIV Env的N277A单点突变是否引导B细胞识别ADCC表位这一关键科学问题。课题的完成将有助于揭示HIV/SIV逃逸宿主免疫反应的机制,为HIV免疫原的设计提供新思路。
英文摘要
An effective AIDS vaccine remains elusive due to the difficulty of immunogen design to elicit protective host humoral immunity. Although HIV/SIV infections result in the abundant production of CD4-induced (CD4i) antibodies (Abs), these Abs are not protective due to steric restrictions following gp120 binding to CD4 on target cell membrane. We have found that similar to viral infection both DNA- and vaccinia-based vaccines encoding SIVmac239 gp160 readily elicited high levels of CD4i Abs in experimental animals. We discovered that a highly conserved N-linked glycosylation site N277 in the C2 region affected the immunogenicity of the CD4i Ab domain. Moreover, immune sera elicited by the N277A-mutated gp160 displayed elevated antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC) activity, which correlated inversely with CD4i Ab titer. Thus we hypothesize that N277A mutation may direct B cell recognition of ADCC epitopes in SIV Env by destroying the immunodominant CD4i domain, thereby increasing Env-induced ADCC activity. In this study, we are going to determine whether N277A mutation directs B cell recognition of ADCC epitopes, which is the key scientific question. Our findings may have implications for immunogen design to direct B cell recognition for the development of an Ab-based HIV vaccine.
人类至今还是没有研发出有效的HIV疫苗,也没有设计出能够诱导宿主产生保护性体液免疫反应的免疫原。尽管HIV / SIV感染导致大量产生CD4诱导性(CD4i)抗体(Abs),但由于gp120与靶细胞上CD4结合后的空间限制,这些Abs没有保护性。在这里,我们报道了编码SIVmac239 gp160的基于DNA和牛痘的疫苗都能在实验动物中引起高水平的CD4i Abs。我们在C2区确定了一个高度保守的N-联糖基化位点N277,它强烈影响CD4i Ab结构域的免疫原性。此外,通过ELISA和酵母抗原展示技术,我们确定了单个N277A位点替换能显着增强了V2结构域的免疫原性,从而产生更高的滴度和抗V2 Ab应答的频率。重要的是,由N277A突变的gp160引发的免疫血清表现出升高的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)活性。ADCC活性与抗V2 Ab滴度呈正相关,与CD4i Ab滴度呈负相关。因此,我们确定了可能影响疫苗引起的针对SIVmac239的抗V2 Ab和ADCC反应的CD4i结构域的决定簇。我们的发现可能对在开发基于Ab的HIV疫苗中指导B细胞识别的免疫原设计有影响。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Sustained IFN-I stimulation impairs MAIT cell responses to bacteria by inducing IL-10 during chronic HIV-1 infection
持续的 IFN-I 刺激在慢性 HIV-1 感染期间通过诱导 IL-10 损害 MAIT 细胞对细菌的反应
DOI:10.1126/sciadv.aaz0374
发表时间:2020-02
期刊:Science Advances
影响因子:13.6
作者:Xian Tang;Shuye Zhang;Qiaioli Peng;Lijun Ling;Huichun Shi;Yang Liu;Lin Cheng;Liumei Xu;Lian Cheng;Lisa Chakrabarti;Zhiwei Chen;Hui Wang;Zheng Zhang
通讯作者:Zheng Zhang
国内基金
海外基金
