绵羊肺腺瘤病毒env与透明质酸酶-2受体相互作用研究

本课题研究重点是绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的“囊膜蛋白(Env)”与其受体绵羊透明质酸酶-2（Hyal-2）的相互作用，以及之后导致靶细胞发生转化癌变的分子机制。我们在以往研究基础上完成了以下工作：绵羊Hyal-2基因的克隆及序列分析；并对绵羊Hyal-2蛋白结构进行预测分析；绵羊Hyal-2真核表达载体的构建及在293T细胞中表达；绵羊Hyal-2原核表达载体的构建并诱导表达及Hyal-2多克隆抗体的制备；稳定表达JSRV受体Hyal-2的小鼠肺上皮细胞系的建立；含绿色荧光蛋白标记的外源性JSRV-Env真核表达载体的构建及其表达；含绿色荧光蛋白标记JSRV-Env的Su及Tm亚基真核表达载体的构建及表达产物鉴定；外源性JSRV-Env原核表达载体的构建；外源性JSRV-Env及其Su和Tm亚基与Hyal-2受体相互作用时可能结合区域的研究；外源性JSRV-Env的SU亚基与Hyal-2可能结合区域的初探；pEGFP-C1-（env、su、tm）与pDsRed-monomer-N1-Hyal-2共转小鼠NIH3T3细胞后对pik3ca、ras基因表达量变化的影响；外源性JSRV-Env与TC-1-pDsRed-Hyal-2细胞和NIH 3T3细胞作用过程中肿瘤相关基因突变的影响及相关细胞因子的表达与动态变化。本课题可为揭示JSRV致瘤机制及实现JSRV的体外培养提供有效的思路和方法。