REV-LTR插入片段改变重组马立克氏病毒野毒株致病性和传播性的分子机制

为阐明整合网状内皮增生病毒(REV)LTR的天然重组马立克氏病毒(MDV)野毒株GX0101演化为容易分离到的流行株的分子机制,用人工染色体克隆技术,构建了GX0101的克隆病毒及其REV-LTR敲除株GX0101ΔLTR。将二病毒以不同比例混合后接种1日龄鸡，再将第2批1日龄鸡置入同一隔离器混和饲养，连续接触感染2-3代，比较观测二个MDV的横向感染性。通过能对这2株病毒作鉴别的荧光定量PCR，比较跟踪了这2株MDV在同一个体内的复制动态上差异，特别是同一鸡体和鸡群内相互间的消长规律。这一模仿自然感染的试验表明，即使以1/10的比例与GX0101ΔLTR同时感染同一鸡群每一只鸡，经过2-3代自然横向感染，带有REV-LTR的GX0101能在鸡群中几乎完全取代最初感染量高10倍的GX0101ΔLTR。这证明插入REV-LTR显著提高了重组GX0101横向传播性，这是它在鸡群中从比例极低的状态不断演化成流行毒株的竞争优势。本研究完成了GX0101株的约178KB大小小的全基因组测序。利用微芯片技术，阐明了REV-LTR插入片段对MDV及其感染细胞不同基因的差异性表达，插入LTR导致14个MDV基因上调10倍以上，1个基因显著下调。插入REV-LTR使其直接下游的SORF2基因表达增强399倍，而敲除SORF2使病毒感染性下降。该研究为进一步揭示影响MDV传播性和致病性的分子机制提供了新的信息。已发表论文3篇，另3篇起草中。