腊状芽胞杆菌ATCC 14579中赖氨酰tRNA合成酶I(LysRS1)和tRNA-Other的生理功能研究

不同生物中存在2种结构完全不同的赖氨酰tRNA合成酶(LysRS1、LysRS2)，负责赖氨酸密码子的准确翻译，但只有极少数生物如腊状芽胞杆菌中同时存在这2种酶，其中LysRS2为管家酶。最近在腊状芽胞杆菌ATCC 14579中发现了一种新的转移RNA：tRNA-Other。体外实验证明LysRS1、LysRS2能够协同作用将赖氨酸连接到tRNA-Other，但体内是否如此还有待证实，另外tRNA-Other携带的氨基酸参与何种反应、如参与蛋白质合成其识别的密码子是什么等完全未知。本课题以上述菌株为研究材料，提取菌体中的tRNA-Other，在体外将同位素标记的赖氨酸连接到tRNA-Other，将其加入离体细胞液中，示踪赖氨酸流向；分析分别敲除编码LysRS1、tRNA-Other基因后的菌株是否合成赖氨酸流向目标化合物，从而推断体内LysRS1、tRNA-Other的生理功能。