微丝细胞骨架调控秀丽隐杆线虫表皮细胞融合机制研究

细胞融合是生物体组织和器官发育的一个重要生物学过程，目前有报道称细胞融合过程需要微丝细胞骨架在融合界面的聚集，但是其调控学机制尚不清楚。目前已知的唯一一类可以直接介导细胞融合发生的蛋白是模式生物秀丽隐杆线虫中介导细胞融合的膜蛋白EFF-1和AFF-1。在本课题中我们首先记录到在线虫表皮细胞hyp7和seam细胞融合过程中微丝骨架的动态变化：seam细胞中微丝细胞骨架会首先形成入侵式的指状聚集，而hyp7中在细胞融合完成后也会形成一圈片状微丝骨架聚集。利用基于CRISPR/Cas9技术的条件性缺失突变体我们发现促微丝骨架聚集因子WASP可以通过条件微丝骨架聚集进而促进细胞融合。通过观察EFF-1动态我们发现EFF-1会在融合起始后在融合孔的位置会有瞬时表达；而在eff-1突变体中虽然细胞膜融合失败但是hyp7细胞中的微丝骨架聚集仍然发生并且随着时间延长GFP信号还是可以进入seam细胞中。这些结果暗示，EFF-1可能不是融合孔的形成所必须，但是融合孔的扩张则需要EFF-1的参与。