本研究以DNA疫苗为研究工具，通过对肠道病毒71型衣壳蛋白VP1基因的优化， 改造基因表达的调控因素，促进目的基因在真核细胞的表达和分泌水平，提高VP1蛋白的免疫原性。.首先，为了使来自于病原体肠道病毒EV71的衣壳抗原VP1基因能够有效的利用真核细胞的转录和翻译系统，很好的在哺乳动物细胞内表达VP1蛋白，对VP1编码基因核苷酸序列按照哺乳动物细胞密码子的偏好性进行优化，并化学合成密码子优化的VP1基因。.其次，为了提高VP1基因在真核细胞的表达和分泌，通过引入信号肽序列、设计双聚体蛋白、以及联合IgG Fc等，共构建了五种密码子优化的VP1 DNA疫苗：VP1-opt，tPA-VP1，VP1-dimer，VP1-huFc和VP1-mFc。研究发现，tPA可以大大增加VP1蛋白的表达和细胞外分泌水平，免疫动物产生抗体的能力也较强。huFc可以进一步增强VP1蛋白的表达和分泌水平。VP1-dimer表达和分泌良好，但免疫动物时免疫原性并未得到提高。去糖基化试验表明，可能是二聚体形式的VP1蛋白不能正常糖基化，失去了表位空间构象所致。VP1-mFc的表达和分泌及其免疫原性均不理想。.文中构建的五种VP1 DNA疫苗在真核细胞表达的VP1蛋白可以被EV71感染的患者血清所识别，这为以后研发快速有效的EV71临床诊断试剂提供了实验依据，也为研制新型高效的EV71候选疫苗，进而防治EV71感染奠定基础。.本课题研究内容以第一作者发表SCI论文1篇，授权发明专利一项，另有一篇文章正在投递过程中。