非酒精性肝炎（NASH）是近年来倍受关注的肝病之一，自由基损伤乃NASH发生的重要环节。本课题复制大鼠NASH模型，分离制备肝细胞，用H2O2模拟自由基损伤。给予重组肝刺激因子(HSS),通过检测膜流动性、脂质过氧化反应、细胞形态及DNA断裂等指标，观察HSS对NASH损伤肝细胞的保护作用。同时，建立HSS转染肝细胞，观察高表达HSS细胞对自由基损伤的敏感性。研究NASH过程中细胞凋亡的作用及HSS是否具有抗凋亡活性。利用定点突变技术，制备HSS半胱氨酸位点的系列突变体，导入肝细胞，观察不同位点突变的HSS所造成的细胞抗损伤作用差异，推测HSS参与抗氧化还原反应的可能靶点。此外，拟采用碘乙酰胺巯基封闭技术，改变HSS分子结构，再通过表达重组HSS突变体，检查其活性，进一步探讨HSS蛋白参与抗氧化损伤的分子机制。通过上述研究，旨在充分阐述HSS治疗NASH的可能性，为其实际应用提供理论依据。