基因修饰小鼠Crouzon综合征模型与三维细胞培养、永生化技术应用于颅缝早闭的实验研究

本项目立项于全面综合现存颅缝早闭常用的细胞与动物模型，分析各利弊，总结当前的研究瓶颈。研究内容包括：运用最新基因修饰动物模型- - Crouzon综合征（Fgfr2c C342Y/+）小鼠，开展颅缝闭合形态学、相关致病基因的表达与分子调控机制研究；开展颅缝细胞三维培养，更好地模拟活体组织内环境，研究三维培养环境下细胞增殖、分化以及骨矿化形成过程，检测比较三维培养、传统二维培养、颅缝早闭患者来源组织以及转基因鼠来源组织，四者间致病基因的差异表达；运用端粒酶转化以延长颅缝细胞生存期，解决传统因体外培养传代细胞性状渐变而局限于应用原代或早期传代细胞进行研究的不足，与未转染对照细胞相比较，分析细胞增殖、分化及致病基因表达随时间发生的变化。本研究突破颅缝早闭的传统研究模型，为颅缝细胞的研究方式带来根本性的技术改良，研究结果将进一步阐明颅缝早闭的细胞分子调控机制，为早日实现疾病的非手术治疗奠定新的理论基础