Rpf结构域突变体的功能及其对MTB休眠菌复苏的影响
批准号:
30972767
项目类别:
面上项目
资助金额:
26.0 万元
负责人:
师长宏
依托单位:
学科分类:
H1104.炎症、感染与免疫
结题年份:
2012
批准年份:
2009
项目状态:
已结题
项目参与者:
樊爱琳、王丽梅、柏银兰、赵勇、白冰、毛峰峰、张彩琴、刘建利
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中文摘要
结核分枝杆菌(MTB)可分泌5种促休眠菌复苏的蛋白-Rpf样蛋白,该类蛋白诱导产生的抗体能抑制MTB的生长,有望用于MTB的免疫治疗,但必须去除其复苏休眠菌的功能。由于5种Rpf样蛋白在功能上有一定的重叠,剔除单个编码基因并不影响MTB的生长,而Rpf结构域具有与Rpf样蛋白相似的功能,因此本研究在已获得多种Rpf结构域突变体的基础上,拟利用MTB体外休眠菌模型筛选出对休眠菌无复苏作用,但其相应抗体能特异性封闭5种Rpf样蛋白的突变体,有效抑制MTB的生长和休眠菌的复苏;观察该突变体的酶活性变化和抗体亲合力;研究突变体在小鼠体内诱导产生的免疫应答和保护力;通过小鼠MTB急性感染模型、持续性感染模型和潜伏感染模型,明确突变体对体内MTB的生长和休眠菌复苏的抑制作用;探索该突变体对休眠相关基因表达水平的影响,为利用Rpf结构域突变体治疗MTB休眠菌持续性感染提供理论和实验依据。
英文摘要
完成了合同书中规定的研究内容,具体包括:表达纯化了结核分枝杆菌中5种Rpf样蛋白以及Rpf结构域(Rpfd)和三种突变体蛋白Rpfd1、Rpfd2和Rpfd3;明确了Rpf结构域及其突变体对耻垢分枝杆菌和临床痰标本中MTB促生长作用;先后制备了MTB潜伏感染细胞模型和小鼠模型;明确了Rpf结构域及其突变体的溶酶体活性和细胞壁裂解活性;Rpfd1、Rpfd2和Rpfd3分别免疫小鼠后诱导产生的抗体水平均高于Rpfd免疫组,其中 Rpfd2 产生的抗体水平最高;免疫小鼠后1w, Rpfd、Rpfd1和Rpfd2免疫小鼠诱生的IFN-γ和IL-2水平均高于生理盐水对照组;Rpfd及其突变体对MTB感染的保护力为Rpfd2 > Rpfd ( Rpfd1) > Rpfd3。Rpfd、Rpfd1和Rpfd2免疫组小鼠肺部病理变化明显轻于生理盐水对照和Rpfd3免疫组,其病理变化程度与BCG免疫组无明显差异。MTB感染小鼠在治疗后11w和13w,Rpfd、Rpfd1、Rpfd2治疗组肺部荷菌量明显少于Rpfd3治疗组和生理盐水组(P<0.05),但其对肺部MTB的控制没有达到INH+RFP联合治疗组的效果。Rpfd、Rpfd1、Rpfd2治疗组肺部肺泡壁增厚程度、肺脏实变程度及淋巴细胞浸润程度均轻于对照组,Rpfd2有望用于TB的免疫治疗。项目共计发表SCI论文6篇,中文核心期刊论文9篇,培养硕士研究生3名,获得国家发明专利2项。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Protection and therapeutic efficacy against challenge with Mycobacterium tuberculosis in mice using a recombinant Mycobacterium smegmatis expressing an HBHA and hIL12 fusion protein
使用表达 HBHA 和 hIL12 融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌对小鼠进行结核分枝杆菌攻击的保护和治疗效果
DOI:--
发表时间:--
期刊:Plos One
影响因子:3.7
作者:Zhao S, Zhao Y, Mao F, Zhang C, Bing B, Zhang H;Shi C,;Xu Zh.
通讯作者:Xu Zh.
DOI:--
发表时间:--
期刊:中国人兽共患病学报
影响因子:--
作者:赵勇;张海;赵善民;伍静;毛峰峰;郭晓雅;张彩勤;师长宏
通讯作者:师长宏
Monoclonal Antibodies Against a Mycobacterium tuberculosis Ag85B-Hsp16.3 Fusion Protein
抗结核分枝杆菌 Ag85B-Hsp16.3 融合蛋白的单克隆抗体
DOI:10.1089/hyb.2011.0047
发表时间:2011-10-01
期刊:HYBRIDOMA
影响因子:--
作者:Zhao, Shanmin;Shi, Jieran;Xu, Zhikai
通讯作者:Xu, Zhikai
DOI:--
发表时间:--
期刊:中国人兽共患病学报.
影响因子:--
作者:郭晓雅;师长宏,;史皆然;张海;赵勇;邵成
通讯作者:邵成
DOI:--
发表时间:--
期刊:现代生物医学进展
影响因子:--
作者:师长宏;赵勇;毛峰峰;张海;白冰;江鹰
通讯作者:江鹰
MAOA驱动前列腺癌神经内分泌转化模型的建立及其机制研究
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:54万元
- 批准年份:2022
- 负责人:师长宏
- 依托单位:
前列腺癌异质性转化PDX模型的建立及其在骨转移机制研究中的应用
- 批准号:32070532
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:58万元
- 批准年份:2020
- 负责人:师长宏
- 依托单位:
基于临床肿瘤标本的胃癌个体化转移模型的建立及评估
- 批准号:31772546
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:62.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:师长宏
- 依托单位:
肿瘤靶向性近红外荧光染料在PDX模型活体成像中的应用及相关机制
- 批准号:31572340
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:64.0万元
- 批准年份:2015
- 负责人:师长宏
- 依托单位:
Hspl6.3和Rpf蛋白对结核休眠菌的作用及其在结核病疫苗研究中的应用
- 批准号:30670116
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:28.0万元
- 批准年份:2006
- 负责人:师长宏
- 依托单位:
分泌型和胞壁型重组BCG菌株的筛选及其保护效应评价
- 批准号:30400381
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:20.0万元
- 批准年份:2004
- 负责人:师长宏
- 依托单位:
国内基金
海外基金















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