WH1fungin佐剂激活巨噬细胞炎症小体的作用机制研究

批准号:
31600740
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
高振秋
依托单位:
学科分类:
C0808.疫苗、抗体与免疫干预
结题年份:
2019
批准年份:
2016
项目状态:
已结题
项目参与者:
刘秋宁、王金、陈艳丽、蒋伏广
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中文摘要
WH1fungin环脂肽是来源于解淀粉芽胞杆菌的一种Surfactin(表面活性素)类生物表面活性剂,经研究发现它是一种安全性良好,具有较强免疫佐剂活性的天然产物,可诱导巨噬细胞产生ROS,促进IL-1β释放,与炎症小体的激活密切相关。本项目在前期研究基础上,从细胞及分子水平上进一步探索WH1fungin佐剂激活炎症小体的作用机理。主要研究内容:WH1fungin体内外刺激巨噬细胞,检测WH1fungin是否可以激活巨噬细胞炎症小体及类型;非变性SDS-PAGE、热电泳及圆二色谱法检测WH1fungin与炎症小体NLRP3、NLRP1、IPAF、AIM2人源重组蛋白相互作用;siRNA转染THP-1分化的巨噬细胞,检测WH1fungin可能作用的炎症小体受体。本项目的开展有助于更好地了解Surfactin类佐剂作用机制,为Surfactin的进一步应用奠定基础,为其开发成疫苗佐剂提供参考。
英文摘要
Cyclic lipopeptide WH1fungin, one kind of Surfactin biosurfactants which was isolated from the culture of Bacillus amyloliquefaciens WH1, was found to be with characteristics of well security and strong immune adjuvant activity in previous studies, WH1fungin could induce ROS produced and IL-1β released in macrophages, which was related with inflammasome activated. Based on the previous studies, we explored the mechanism of WH1fungin activating inflammasome. WH1fungin whether could activate inflammasome and which types of inflammasome could be activated, We will detect WH1fungin whether could interact with human inflammasome by non denatured SDS-PAGE, Thermal electrophoresis, circular dichroism in vitro and by siRNA transfaction of macrophages differentiated from THP-1 cell. The study of the mechanism of WH1fungin activating inflammasome in macrophages will not only help to better understand the mechanism of adjuvant of Surfactin, but also for further application of Surfactin, and could provide references of its development into a vaccine adjuvant.
WH1fungin环脂肽是来源于解淀粉芽胞杆菌,安全性良好,具有较强免疫佐剂活性的一种Surfactin(表面活性素)类生物表面活性剂,以诱导CTL反应、抗原储存和缓释、抗原提呈、免疫调节等方式发挥其免疫佐剂作用,研究发现WH1fungin可以诱导巨噬细胞产生ROS,促进IL-1β表达释放,与炎症小体的激活密切相关。本项目主要研究目的是对WH1fungin佐剂激活巨噬细胞炎症小体类型,是否通过ROS介导激活炎症小体,进而促进IL-1β表达分泌释放,增强免疫效应的作用机制进行探讨。通过不同浓度WH1fungin及时间处理巨噬细胞,确定WH1fungin刺激巨噬细胞产生ROS的最佳处理浓度和时间(体内实验为:100 μg/只,48 h,72 h;体外实验为:5 μg/mL,8 h);利用特异性ROS抑制剂预处理法,对线粒体系统,NADPH氧化酶系统、黄嘌呤氧化酶系统、环氧酶系统进行检测,激光共聚焦显微镜观察WH1fungin在细胞内的定位,结果表明WH1fungin促进巨噬细胞产生的ROS主要来源于线粒体;ROS抑制剂预处理,Western blot结果分析WH1fungin可通过ROS激活MAPKs信号转导通路,进而激活NF-κB, 调节细胞的增殖、分化、炎症、凋亡等生理生化过程;WH1fungin刺激巨噬细胞激活炎症小体受MAPKs信号转导通路的调节;ROS抑制剂预处理,RT-PCR检测炎症小体相关蛋白及IL-1β表达情况,确定了WH1fungin通过激活线粒体途径的ROS进而激活巨噬细胞炎症小体,促进IL-1β分泌释放,进行免疫调节,促进先天免疫防御及获得性免疫应答。该项目研究结果初步探讨了表面活性素WH1fungin佐剂激活巨噬细胞炎症小体,促进免疫应答的作用机制,有助于更好地了解Surfactin类佐剂作用机制,为良好的新型疫苗佐剂候选者WH1fungin的进一步开发成疫苗佐剂奠定基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Optimization of oncolytic effect of Newcastle disease virus Clone30 by selecting sensitive tumor host and constructing more oncolytic viruses.
选择敏感肿瘤宿主并构建更多溶瘤病毒优化新城疫病毒Clone30溶瘤效果
DOI:10.1038/s41434-020-0145-9
发表时间:2021-12
期刊:Gene therapy
影响因子:5.1
作者:Liu T;Zhang Y;Cao Y;Jiang S;Sun R;Yin J;Gao Z;Ren G;Wang Z;Yu Q;Sui G;Sun X;Sun W;Xiao W;Li D
通讯作者:Li D
DOI:https://doi.org/10.1038/s41434-020-0145-9
发表时间:--
期刊:Gene Therapy
影响因子:--
作者:Tianyan Liu;Yu Zhang;Yukai Cao;Shan Jiang;Rui Sun;Jiechao Yin;Zhenqiu Gao;Guiping Ren;Zhenzhong Wang;Qingzhong Yu;Guangchao Sui;Xu Sun;Wenying Sun;Wei Xiao;Deshan Li
通讯作者:Deshan Li
cDNA cloning and expression analysis of a hepcidin gene from yellow catfish Pelteobagrus fulvidraco (Siluriformes: Bagridae)
黄颡鱼铁调素基因的 cDNA 克隆及表达分析
DOI:10.1016/j.fsi.2016.10.049
发表时间:2017
期刊:Fish & Shellfish Immunology
影响因子:4.7
作者:Liu Qiu-Ning;Xin Zhao-Zhe;Zhang Dai-Zhen;Jiang Sen-Hao;Chai Xin-Yue;Wang Zheng-Fei;Li Chao-Feng;Zhou Chun-Lin;Tang Bo-Ping
通讯作者:Tang Bo-Ping
Surfactin inducing mitochondria-dependent ROS to activate MAPKs, NF-κB and inflammasomes in macrophages for adjuvant activity.
表面活性素诱导线粒体依赖性 ROS 激活巨噬细胞中的 MAPK、NF-κB 和炎症小体,从而发挥佐剂活性
DOI:10.1038/srep39303
发表时间:2016-12-14
期刊:Scientific reports
影响因子:4.6
作者:Gan P;Gao Z;Zhao X;Qi G
通讯作者:Qi G
An immuno-blocking agent targeting IL-1β and IL-17A reduces the lesion of DSS induce ulcerative colitis in mice
针对 IL-1β 和 IL-17A 的免疫阻断剂可减少 DSS 诱发小鼠溃疡性结肠炎的病变
DOI:--
发表时间:--
期刊:Inflammation
影响因子:5.1
作者:Qi Yin;Xuelei Pi;Yuanyuan Jiang;Guiping Ren;Zhihang Liu;Han Liu;Mengxia Wang;Wenying Sun;Siyu Li;Zhenqiu Gao;Deshan Li;Jiechao Yin
通讯作者:Jiechao Yin
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