【研究背景】肝癌的早期筛查是肝癌治疗的关键。影像学技术的发展为肝癌的早期诊断提供了良好的手段，尤其是MRI。但是应用MRI检测小于0.5 cm肝癌存在困难。肿瘤细胞纳米磁珠富集可以增加MRI检测灵敏度，提高对小肝癌的检测率。【研究内容】1.纳米磁珠偶联叶酸的化学构建与鉴定。2. HE染色或电镜下观察处理细胞磁珠叶酸富集变化；应用免疫组化和Western Bloting分别检测叶酸受体的细胞定位和表达量，证明叶酸受体对磁珠叶酸增加吸收功能。3. 构建AAV肿瘤特异性叶酸受体表达系统，以及稳转AAV肿瘤特异性叶酸受体表达系统的肝癌细胞系。4.合成新的纳米颗粒影像学诊断试剂。5. miR-302b、miR-214、miR-15b-5p在肝癌中的作用机制。【研究结果】1.成功构建纳米磁铁偶联叶酸颗粒（fluid MAG-fa），且该颗粒在浓度大于40mg/L时在HeLa细胞中的摄取量大于对照组（fluidmAG-Mine），其摄入机制为细胞内吞，且有明显的能量依赖机制。2. 体外MRI检测了fluid MAG-fa，fluidMAG-fa可以明显引起磁共振信号的阵低。3.成功构建表达叶酸受体（FR）的AAV载体，并感染HepG2，筛选稳转细胞系，称为EGFP/FR-HepG2。用western blot验证EGFP/FR-HepG2细胞中FR含量高于对照组。4.显微镜下观察处理细胞磁珠叶酸富集变化，结果显示：EGFP/FR- HepG2细胞胞质内存在蓝色铁颗粒，染色的深浅与所加SPIO-Fa复合物的剂量成正相关。体外MRI结果显示：HepG2-fr转染细胞叶酸纳米磁铁颗粒组MRI信号较其他各组降低明显，20mg/L信号组显著降低。5. 纳米颗粒GNa-Er@Nd可以在双波长793nm和980nm下激发上转换冷光（UCL），可以成为MRI、CT及UCL一种新的影像学检测试剂。5. miR-302b通过靶向AKT2、miR-214靶向E2F3、miR-15b-5p靶向Rab1A而实现对肝癌细胞的增殖抑制与诱导凋亡。【科学意义】1.纳米磁铁叶酸颗粒的构建结合肿瘤特异性表达叶酸受体慢病毒系统可以为肝癌早期MRI诊断奠定了理论与实践基础。2.肝癌中抑癌miRNAs的发现为肝癌的基因治疗提供理论依据。