MARVELD1参与的肿瘤细胞mRNA 5′-Cap加工及无义介导mRNA降解机制研究

本研究前期发现MARVELD1 在肺癌、乳腺癌和肝癌等多种恶性肿瘤组织和细胞系中表达显著下调。根据该蛋白的细胞内定位及其对细胞表型的影响，本项目深入分析了MARVELD1的生物学功能，利用免疫共沉淀技术探讨了其在细胞核内 与Importin-β、CBC复合体之间的相互作用，并通过实时定量分析了多种黏附相关蛋白的mRNA与前体mRNA的表达情况，确定了MARVELD1 与mRNA 5′-Cap 加工机制的关系，在此基础上开展了功能结构域的研究，确认了MARVELD1与Importin-β相互作用的功能位点，揭示了MARVELD1参与了细胞黏附相关分子integrinβ1 mRNA 加工的分子基础。本课题进一步结合前期生物信息学预测结果，探讨了MARVELD1 与NMD 的关系，通过免疫荧光及免疫共沉淀技术证实了MARVED1与NMD的核心因子UPF1和SMG1存在相互作用，从而证实MARVLED1参与了NMD通路。通过外源导入PTC-mRNA重组体质粒，建立了NMD机制研究的模式细胞，进一步解析了MARVLED1对NMD 机制及功能的影响。在完成以上研究内容同时，本项目课题组还研究了MARVELD1与肝细胞癌（HCC）发生、发展的关系，通过免疫组化技术进一步探讨了MARVELD1在HCC中的表达变化及其表达下调的分子基础具有与肺癌相识的机制，并深入分析了MARVELD1的表达与HCC细胞增殖的关系及其机制，进而明确了其表达对临床药物敏感性的影响。本项目的研究结果解析了MARVELD1 在RNA加工机制中的功能意义，并揭示了与肿瘤细胞mRNA 水平自我监控机制的关系，完善了我们对癌细胞自我监控机制紊乱的机制认识，为抗肿瘤治疗和预防提供新的径。