siRNA干扰MMP-9基因表达保护血脑屏障治疗缺血性脑损伤的实验研究

脑血管疾病早期对血脑屏障的破坏，造成血脑屏障通透性升高，从而引发的脑水肿是造成病人死亡的主要原因之一。脑血管意外时由血管内皮细胞产生的基质金属蛋白酶（MMPs）降解血管基底膜,被认为是增加血脑屏障通透性的主要原因。本项目采用基因工程技术，制备出MMP-9 小发夹型RNA（ShRNA），分别与真核载体和逆转录病毒表达载体结合，然后进行MMP-9RNAi载体的转染和阻断MMP-9表达功能的离体和在体的实验研究。将MMP-9RNAi载体转染到缺氧条件下体外培养的脑血管内皮细胞，分别检测MMP-9mRNA基因和蛋白的表达。对MMP-9载体经血液转染体内靶细胞的在体研究后，将MMP-9siRNA载体转入大脑中动脉栓塞的大鼠模型体内，结合不同MMPs抑制剂的应用和MMP-9转基因小鼠脑缺血的动物对照试验，探索应用MMP-9基因干扰保护血脑屏障治疗脑卒中的可能性，为脑卒中的治疗提供新的策略。