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家蚕黑胸败血菌芽孢杆菌的毒素及其结合蛋白的鉴定、功能和相互作用研究
结题报告
批准号:
31001034
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
程廷才
依托单位:
学科分类:
C1709.养蚕学
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
段军、牛维环、胡忠雷、谢小东、张兴坦、刘玟杉、祝慧敏
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中文摘要
黑胸败血芽孢杆菌(Bacillus bombyseptieus)是家蚕细菌性败血病的主要病原之一,但目前对其致病机理知之甚少。项目组前期通过家蚕基因芯片,系统性分析了黑胸败血芽孢杆菌触发家蚕的中毒反应、细胞和体液免疫反应,并在黑胸败血芽孢杆菌中分离到一个不同于Bt毒素的新型毒素蛋白,其分子量约为35kD。在此基础上,本项目利用蛋白分离纯化、质谱分析和蛋白活性分析等,研究新型毒素蛋白的理化性质和生物活性,并与Bt毒素比较其差异性;采用免疫共沉淀和荧光免疫组化方法,筛选和鉴定家蚕中肠毒素结合蛋白、表达蛋白定位及生物学功能,进一步阐明黑胸败血芽孢杆菌的致病机理和病原与宿主相互作用关系。本项目的研究成果将在家蚕抗病品系培育研究方面具有重要的产业价值,也将在鳞翅目害虫防治和病原微生物-宿主昆虫相互作用方面具有重要的理论和应用价值。
英文摘要
黑胸败血芽孢杆菌是家蚕细菌性败血病的主要病原之一。本项目通过分离纯化、MAL-TOF/TOF质谱鉴定和基因克隆分析,成功分离并鉴定了该病原的新型毒素蛋白。通过原核表达纯化,获得该毒素蛋白的重组蛋白,添食家蚕幼虫,结果显示其对家蚕幼虫具有显著的致死活性。采用Far western blot、Co-IP、Pull-down和ELISA等实验,结果显示,中肠特异表达的3个胺肽酶(APN4-6)和钙粘蛋白BtR-175等受体均能与毒素蛋白相互结合。通过细胞转染实验,家蚕APN4,APN5和APN6均能与毒素蛋白孵育时均导致细胞形态改变和死亡。上述结果表明,家蚕黑胸败血芽孢杆菌的感染机制可能是毒素蛋白与中肠上的受体(APN和BtR-175)相结合,破坏中肠结构,促使病原菌进入血淋巴,引起宿主昆虫的继发性感染。此外,项目组也对该毒素蛋白在家蚕抗病素材培育和鳞翅目害虫防控等领域的应用开展了探索性研究。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2011
期刊:蚕业科学
影响因子:--
作者:许平震;张美蓉;程廷才;夏庆友;
通讯作者:
Genome-wide analysis of the ATP-binding cassette (ABC) transporter gene family in the silkworm, Bombyx mori
家蚕 ATP 结合盒 (ABC) 转运蛋白基因家族的全基因组分析
DOI:10.1007/s11033-012-1558-3
发表时间:2012-02
期刊:Molecular Biology Reports
影响因子:2.8
作者:Xie, Xiaodong;Cheng, Tingcai;Wang, Genhong;Duan, Jun;Niu, Weihuan;Xia, Qingyou
通讯作者:Xia, Qingyou
DOI:10.1371/journal.pone.0018109
发表时间:2011-03-29
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Yang W;Cheng T;Ye M;Deng X;Yi H;Huang Y;Tan X;Han D;Wang B;Xiang Z;Cao Y;Xia Q
通讯作者:Xia Q
DOI:--
发表时间:2012
期刊:中国农业科学
影响因子:--
作者:陆改;程廷才;蒋亮;金盛凯;林平;胡翠美;夏庆友;LU Gai,CHENG Ting-cai,JIANG Liang,JIN Sheng-kai,LI
通讯作者:LU Gai,CHENG Ting-cai,JIANG Liang,JIN Sheng-kai,LI
Resistance to BmNPV via overexpression of an exogenous gene controlled by an inducible promoter and enhancer in transgenic silkworm, Bombyx mori.
转基因家蚕中诱导型启动子和增强子控制的外源基因过表达对 BmNPV 的抗性
DOI:10.1371/journal.pone.0041838
发表时间:2012
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Jiang L;Cheng T;Zhao P;Yang Q;Wang G;Jin S;Lin P;Xiao Y;Xia Q
通讯作者:Xia Q
家蚕Osiris蛋白在丝蛋白分泌和茧丝性能形成过程中的生物学功能研究
  • 批准号:
    32372949
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    50万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    程廷才
  • 依托单位:
鳞翅目特异Osiris9基因的功能及应用研究
  • 批准号:
    31872296
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    25.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    程廷才
  • 依托单位:
国内基金
海外基金