p38MAPK信号通路在硒诱导白血病细胞自噬与凋亡中的调控作用

本申请项目深入研究亚硒酸钠在不同细胞（白血病和结直肠癌细胞）中对于自噬与凋.亡的转换调控作用，深入探讨了不同细胞中自噬对亚硒酸钠诱导凋亡的影响。并建立了白血病和结肠癌裸鼠模型。对细胞学研究结果在裸鼠模型肿瘤组织进行了验证。获得了如下创新性研究结果。.1..发现在NB4细胞中P38MAPK活性由MAPK级联通路介导,降低HSP90表达释放P38MAPK活性,通过PERK/eIF2α/ATF4通路调控细胞自噬和凋亡。.2..同时还发现ROS在硒诱导自噬和凋亡调节中发挥重要作用。发现硒可以显著诱导肿瘤细胞ROS上升，抑制JNK/ATF2信号通路。使周期相关蛋白cyclin A，cyclin D，和CDK4等表达下调，最终使NB4细胞阻滞在细胞周期的G0/G1期，使细胞走向凋亡。.3..进一步深入研究发现，ULK1作为自噬的起始物促进自噬对凋亡的调节作用，在NB4细胞中ROS抑制自噬是通过降低ULK1表达介导了P53的磷酸化。而P-P53（S359）的磷酸化主要是P70S6K结合到ULK1启动子引起的。.4..还发发现RhoA-ROCK1通路在白血病细胞中异常活化；ROCK1起到脚手架蛋白的作用，在与活性RhoA结合后，ROCK1限制Erk1/2的活化与转位，抑制细胞凋亡。硒破坏ROCK1与Erk1/2的结合，导致后者活化并转位至核中，上调Bax的表达诱导细胞凋亡。.5..上述工作均在建立的NB4细胞裸鼠模型肿瘤组织中进行了验证，得到了基本一致的结果。为自噬与凋亡转换提供了理论和实验依据。为白血病的治疗提了新的药物靶标。.6..除了在白血病细胞进行了研究，同时在实体瘤结肠癌细胞中也进行了研究。发现硒诱导结肠癌细胞凋亡，AKT/FoxO3a信号通路在凋亡中发挥着重要作用与角色，亚硒酸钠能抑制AKT的上游Src/PI3K/PDK1通路。硒处理的细胞中FoxO3a能特异地积累到核内，通过其靶基因发挥作用。我们建立了裸鼠癌结肠癌模型,在癌组织中的验证,通过Western blot及免疫组化实验发现亚硒酸钠能引起组织内AKT/β-catenin/FoxO3a等分子同细胞系中一致的变化，表明它们参与了细胞凋亡。.7..研究还发现在亚硒酸钠诱导凋亡早期，接头蛋白RIP1上赖氨酸63型多聚泛素链被移除，从而导致caspase8/RIP1/FADD复合物和形成及caspase