定位于着丝粒的新发现蛋白F46ag的基因克隆和功能分析

本项目组研究发现一例进行性系统性硬皮病自身免疫血清（F46）的抗原定位于着丝粒，是单一分子量的蛋白F46ag（在HeLa细胞和印度麂培养细胞IM中分别是65kd和67kd）；并发现尽管迄今被命名的Cenps已至少有9种，但单环刺螠(Urechis unicinctus)中只检测到F46ag和CenpG，而缺乏可被别的抗血清（ACAs）识别的Cenps，具有简单性。单环刺螠是中国北方沿海常见的螠虫动物，雌雄异体、产卵量大、受精条件简单且受精率高。鉴于着丝粒在染色体结构、功能和细胞分裂中特殊的重要地位，基于F46ag的特异性存在，本研究利用单环刺螠，通过免疫沉淀、双向电泳、微量蛋白测序和cDNA文库筛选等进行F46ag的基因克隆和序列分析；用重组DNA技术、PCR、RNAi、显微细胞化学和免疫印迹等技术研究其功能，特别是与细胞增殖调控及分化等的关系。这一研究具有重要的分子细胞生物学和进化意义。