结核菌是肺结核病的病原菌，以ESAT-6为代表的分泌蛋白是一类非常重要的致病因子。ESAT-6通过ESX-1系统分泌到体外。ESAT-6的编码基因在RD-1区，在RD-1上游的espA对ESX-1的功能是必不可少的。由于EspA也是ESX-1的底物蛋白，因此，EspA与ESAT-6等其它ESX-1系统底物蛋白的分泌相互依赖，为ESX-1的调控提供了另一种可能，即通过EspA实现对ESX-1系统的调控。目前，已知的ESX-1的调控因子包括PhoPR，EspR和MprAB。EspR和MprA可以直接结合在espA启动子上，激活espA，促进ESX-1系统的分泌，但PhoPR的调控途径未知。..EspR、MprA和 PhoP似乎都是通过直接或间接影响espA的表达实现对ESX-1系统的调控，那么这三个调控因子之间是否存在潜在的调控关系？本项目的主要目的在于揭示ESX-1的三个调控因子之间是否存在交叉调控关系，解析调控因子与EspA形成的立体调控网络。..综合本研究的结果，我们提出了ESX-1的调控网络模型，并：1，推测了PhoPR调控ESX-1系统的途径。在phoP突变菌中虽然espA操纵子的表达降低，但PhoP并不能结合espA的启动子序列，说明PhoP对ESX-1的调控必须由其它因子介导。我们的研究发现PhoP可以结合espR启动子的上游序列，产生一段约30-bp的保护区。由于EspR对espA的直接调控以及在phoP突变菌中espA的表达下调，我们推测EspR可能介导了PhoPR对ESX-1系统的调控；2，发现了MprAB调控ESX-1的两个新途径。此前的研究表明espA启动子的上游序列存在多个MprA结合位点，说明MprA可以通过通过直接影响espA调控ESX-1系统的功能。在本研究中我们发现MprA也能结合espR启动子的上游序列，产生两个保护区，提示除了直接由EspA介导的途径，MprA也可能通过EspR一步介导调控ESX-1。我们进一步发现MprA可以特异结合phoP启动子序列，因此MprA也可能通过由PhoP到EspR的二步介导调控ESX-1系统；3，揭示了MprA与PhoP的竞争关系。由于MprA和PhoP都可以直接结合espR的上游序列，而且两者的保护区重叠，在与espR启动子相互作用时，MprA与PhoP存在竞争关系。