TLR4及其基因多态性与军团菌宿主易感性的研究

目的：本课题拟用分子流行病学的方法从群体研究和实验研究两方面探讨TLR4及其基因多态性与军团菌易感性的关系。.方法：用分析性流行病学的方法分析TLR4的基因多态性的分布及其与人群军团菌病易感性的关系；对TLR4基因功能缺失小鼠和野生小鼠感染军团菌后，探讨TLR4及LPS干预对军团菌的影响；用军团菌刺激健康人外周血PBMC，从细胞水平探讨TLR2/4/5基因多态性与军团菌宿主易感性的关系。.结果：人群实验结果显示TLR2和TLR4与人群军团菌病感染有关；健康人对照组TLR4(G2244A)位点AA基因型发生频率高于GG/GA型，提示TLR4 (G2244A) 位点多态性与军团菌和其它非革兰氏阴性菌易感性可能有关；军团菌及其他非革兰氏阴性菌感染可能上调MyD88、IFN-β和IL-10的表达。病人和健康人对照组中AA型组MyD88和IL-10表达高于GG/GA型，IFN-β浓度低于GG/GA型，提示TLR4（G2244A）基因多态性与MyD88、IFN-β和IL-10可能有关。.动物试验结果显示在BALB/C小鼠中TLR4、TLR2与军团菌感染无关；而IL-6和TNF-α与军团菌感染有关。采用基因突变小鼠C3H/HeJ制备军团菌感染模型后，C3H/HeN染菌组与C3H/HeN对照组的PBMC上TLR4蛋白水平没有差异，提示TLR4未参与军团菌的抗感染作用，C3H/HeJ染菌组、C3H/HeN染菌组TNF-α、IL-1β浓度均高于对照组；且结果显示LPS干预可缓解军团菌感染时出现的炎症反应，起到保护作用。.体外研究发现TLR2 及MyD88参与抗军团菌感染、TLR4尚未发现与军团菌感染有关，IL-1β、IL-6和TNF-α与军团菌感染有关；TLR2 C597T (rs3804099)和TLR5 C1174T (rs5744168)多态性与军团菌感染有关，rs3804099CT/TT 与rs5744168CC可能为军团菌病的保护性基因；TLR4 (G 2244A)的结果不确定，有待于进一步的研究；TLR4(A2299G)及TLR4(T2242C)SNP与军团菌宿主易感性无关。.结论：TLR2及其基因多态性参与军团菌感染过程并与宿主易感性有关，而TLR4与军团菌感染及宿主易感性的关系在本研究未得出明确结论，还需进一步研究，TLR5多态性与军团菌宿主易感性可能有关。