人源尘肺病噬菌体单链抗体库的构建及筛选

批准号:
81072278
项目类别:
面上项目
资助金额:
33.0 万元
负责人:
姚武
依托单位:
学科分类:
H3002.职业卫生与职业病学
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
郝长付、李志远、李举、翟伟、高彬、王永星
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中文摘要
尘肺病的危害依然十分严重,其发生发展过程与免疫调节密切相关。筛选能够反映粉尘接触或尘肺发生发展过程的标志性抗体,对解释尘肺发病分子机制、进行尘肺发病的早期预警和诊断可能具有重要的意义。拟采用噬菌体单链抗体库技术,构建人源尘肺病抗体库,并对抗体库进行筛选鉴定,然后通过人群病例对照研究验证其时效特征,寻找尘肺病特异性抗体生物标志,阐述其在尘肺病发生发展过程中的变化规律,为进一步完善尘肺健康监护、早期预警、诊断及病程监测提供可能的辅助指标,并为尘肺病的免疫治疗提供新的思路。
英文摘要
目的:建立人源尘肺噬菌体单链抗体库,并进行筛选、鉴定,进而通过流行病学调查进行人群鉴定,寻找可能的尘肺病特异性自身抗体。方法:采用噬菌体单链抗体库技术建立人源尘肺噬菌体单链抗体库,然后进行富集、筛选、鉴定;通过病例对照流行病学研究,采用Elisa法对体外鉴定出的单链抗体进行人群鉴定。结果:本研究成功构建了库容为2.4×107的全人源尘肺病噬菌体单链抗体库,抗体库多样性良好。经比对,鉴定出6个强阳性scFv克隆依次为血管内皮生长因子(VEGF)scFv,白介素-18(IL-18)scFv,热休克蛋白-70.1(HSP-70.1)scFv,人表皮生长因子受体3(Human epidermal growth factor receptor 3,HER3)scFv,颗粒酶B(Granzyme B,GrB)scFv和类风湿因子(RF)scFv。收集尘肺组557例、接尘组308例、对照组393例共1258例调查对象血清,ELISA 法检测各组血清中IL-18抗体、颗粒酶B抗体、表皮生长因子受体3抗体、类风湿因子和血管内皮生长因子抗体的表达。检测结果显示各组人群血清中IL-18 Ab、VEGF Ab、GrBAb和RF Ab的表达与尘肺发病进程有关,分析时对调查对象进一步进行了年龄分层。结果显示年龄对5种抗体的表达水平存在影响,尘肺组、对照组人群血清中5种抗体的表达水平均有随年龄增加而增高的趋势。对各组30~50岁的调查对象进行分析发现接尘组中RFAb、VEGFAb水平最高,病例组其次,对照组最低,且差异有统计学意义(P<0.05)。在尘肺组不同分期人群血清中IL-18 Ab、HER3 Ab、GrBAb和RF Ab浓度差异均无统计学意义(P>0.05);尘肺组壹期和贰期人群血清中的VEGF Ab的表达和观察对象相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:本研究成功了构建人源尘肺噬菌体单链抗体库,并筛选、鉴定出6个强阳性scFv克隆,通过流行病学调查,对鉴定出的尘肺病的5种特异性抗体进行了验证,发现GrBAb、RF Ab和 VEGF Ab与尘肺的发生密切相关,值得进一步探讨其影响机制。RF Ab和 VEGF Ab在接尘组中表达水平最高,二者可能是尘肺早期变化的指标。
期刊论文列表
专著列表
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会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2011
期刊:河南医学研究
影响因子:--
作者:王明君;孙雁玲;汪涵;姚武;郝长付
通讯作者:郝长付
DOI:--
发表时间:2011
期刊:郑州大学学报(医学版)
影响因子:--
作者:翟伟;郝长付;高彬;姚武
通讯作者:姚武
DOI:--
发表时间:2012
期刊:河南医学研究
影响因子:--
作者:晋晓飞;郝长付;姚武
通讯作者:姚武
DOI:10.3967/0895-3988.2013.09.006
发表时间:2013-09
期刊:Biomedical and environmental sciences : BES
影响因子:--
作者:Changfu Hao;X. F. Li;Wu Yao
通讯作者:Changfu Hao;X. F. Li;Wu Yao
DOI:--
发表时间:2011
期刊:卫生研究
影响因子:--
作者:高彬;郝长付;王永星;姚武
通讯作者:姚武
基于纳米石墨烯吸入体内的代谢转归筛选暴露生物标志物
- 批准号:82241093
- 项目类别:专项项目
- 资助金额:52.00万元
- 批准年份:2022
- 负责人:姚武
- 依托单位:
外泌体miRNA介导的细胞间通讯在实验性矽肺发生发展中的作用
- 批准号:81773404
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:60.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:姚武
- 依托单位:
树突状细胞在实验性矽肺发生发展中的作用与机制
- 批准号:81273039
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:60.0万元
- 批准年份:2012
- 负责人:姚武
- 依托单位:
国内基金
海外基金
