三种食物中毒性海洋生物毒素融合单链抗体的制备及筛检方法的初步研究

大田软海绵酸、石房蛤毒素、河豚毒素是海产食品中常见的中毒性海洋毒素，由于是小分子物质，多采用高效液相色谱法检测，目前国内还没有很好的快速检测方法。本试验将这三种小分子毒素分别制备成完全抗原后，免疫BALB/c小鼠，常规细胞融合技术，制备分泌抗上述毒素的杂交瘤细胞株，大量制备并纯化抗体，对抗体效价、亚类、敏感性和特异性等特性充分研究后,分别建立各自的免疫学检测方法；同时从各杂交瘤细胞中反转录调取各单克隆抗体的VH、VL基因，设计Linker采用PCR法组装各自的单链抗体基因（ScFv）并将三种毒素的ScFv基因串联，在真核系统(pPIC9-酵母系统)中分泌表达，获得抗三种毒素的多特异性的融合单链抗体；分析其对三种毒素的特异性和敏感性，初步建立快速、灵敏、高效的同时检测三种毒素的免疫学筛检定性方法。本试验将为食品污染物中小分子物质建立快速的免疫学筛检方法奠定理论和方法学基础，并提供新的模式。