与弓形虫微线蛋白互作的宿主蛋白的筛选、鉴定及功能研究

弓形虫是一种可以感染人类和多种温血动物的专性细胞内寄生原虫，其具有广泛的宿主范围。该寄生虫如此广泛的宿主范围得益于其成功的入侵宿主细胞和调节宿主信号转导的机制。多种研究表明，弓形虫微线体蛋白是弓形虫入侵细胞的关键蛋白，在黏附宿主细胞和调节宿主信号过程中起着重要作用，但与微线体蛋白黏附相关的宿主蛋白仍不清楚，为此本研究拟用弓形虫微线体蛋白作为诱饵筛选、鉴定与其相互作用的宿主蛋白。利用酵母双杂交技术筛选到了与弓形虫微线体蛋白MIC2整合素A样结构域有相互作用的宿主蛋白2个，与弓形虫微线体蛋白MIC3有相互作用的宿主蛋白8个，没有得到与AMA1相互作用的宿主蛋白。利用多种蛋白质互作技术进行验证证实MIC3可以与宿主的Spata3和DKK2相互作用，并鉴定出了MIC3的EGF结构域是与宿主蛋白互作的关键结构域。上述结果为弓形虫的黏附机制、分子致病机理、基因工程疫苗研究和药物设计提供理论依据，同时为顶复门寄生虫入侵细胞机制的研究提供新的模型和思路。