基于蛋白质组学策略的新肌炎特异性自身抗体的鉴定与功能初步探讨
结题报告
批准号:
81771766
项目类别:
面上项目
资助金额:
25.0 万元
负责人:
张华莉
依托单位:
学科分类:
H1107.自身免疫性疾病
结题年份:
2019
批准年份:
2017
项目状态:
已结题
项目参与者:
朱红林、李通、王念、王莉、肖亦之、黄莉、杨洋
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中文摘要
肌炎特异性自身抗体(MSAs)对于肌炎的诊断、分型、疗效评估和预后判断均有重要的指导意义。虽然十七种MSAs已被鉴定,但是这些抗体的总阳性率仅为50-60%,因此仍然有自身抗体尚未被发现。本课题组通过高通量的自身抗原芯片的筛查,发现15例肌炎患者的MSAs检测均为阴性。本课题拟采用自身抗原芯片结合非放射免疫沉淀法继续筛查肌炎患者人群的自身抗体谱,进一步筛选抗体阴性的血清样本。进一步采用含9000个蛋白质的芯片、骨骼肌或肺裂解液,在自身抗原芯片筛查为抗体阴性的肌炎患者血清中寻找新自身抗体,通过免疫层析纯化和质谱分析鉴定新自身抗原,并研究其在肌炎患者人群中的阳性率和相关的临床表现。开展本项目,可望促进肌炎的精准诊治和预后判断,并发现新的肌炎特异性自身抗体,为肌炎的诊断和疾病分型提供新的思路。
英文摘要
Myositis specific autoantibodies have been extensively demonstrated to be important biomarkers for myositis, aiding in diagnosis, helping to classify patients into more homogeneous groups, predicting additional clinical complications and response to treatment. Untill now seventeen kinds of myositis specific autoantibodies have been identified in about 50% -60% of patients with myositis, which means that a number of novel myositis autoantibodies need to be investigated. Our study had found that 15 patients with myositis were screened as negative for all known myositis specific autoantibodies using autoantigen microarray. The present study will continue to screen for autoantibodies profile in chinese cohort with myositis using autoantigen microarray combined with non-radiolabelled immunoprecipitation . For the serums with negative autoantibodies, the protein microarray or muscle lysate or lung lysate will be used to identify novel myositis autoantibodies. The novel myositis autoantigens will be confirmed by immunoaffinity purification and mass spec. The prevalence and associated clinical features of novel myositis autoantigens will be investigated in patients with myositis. The aim of the present study is to find more biomarkers including the differentially expressed genes, serum cytokines and novel myositis autoantigens for aiding in diagnosis, subsets, predicting response to treatment and prognosis for myositis.
肌炎特异性自身抗体(MSAs)对于肌炎的诊断、分型、疗效评估和预后判断均有重要的指导意义。本项目采用含128个自身抗原芯片对138 例肌炎患者、70 例SLE患者、50例 SSc患者 和 100 例健康对照的自身抗体谱进行分析,在肌炎中阳性率最高的仍是JO-1(24.6%)和MDA5(23.2%)。82.4%的患者血清中至少存在一种MSAs,且MSAs的共存现象,即存在两种或两种以上的MSAs,出现在41.7%的肌炎患者中。分析各种自身免疫性疾病自身抗原谱的特征,建立自身免疫性疾病的诊断模型,并发现联合检测多种自身抗体具有更高的诊断和预测价值。建立检测MDA5、NXP2、 HMGCR 、SAE1、EJ等肌炎特异性自身抗体的非放射免疫沉淀法,证实自身抗原芯片筛选的阳性患者。进一步用Illumina HT-12 v4表达谱芯片对抗MDA5阳性、抗Jo-1阳性的肌炎患者及正常对照者的外周血单个核细胞进行基因表达谱分析,发现抗Jo-1抗体阳性和抗MDA5抗体阳性患者PBMC的基因表达谱存在明显差异;我们对抗Jo-1抗体阳性和抗MDA5抗体阳性患者特异性的DEGs分别进行生物学功能以及信号通路分析,发现抗MDA5抗体阳性患者中表达上调的基因富集于RIG-Ⅰ样受体、Toll样受体、I型干扰素等病毒感染应答通路;表达下调的基因属于抗原加工提呈(HLA-A)、自然杀伤细胞介导的细胞毒作用、TGF-β受体信号通路调节等通路。RT-PCR证实RIG-I样受体通路中的IFIH1、ISG15和DDX58以及趋化因子CCL2、CCL8在抗MDA5抗体阳性肌炎患者的PBMC呈高表达。采用含9000个蛋白质的芯片在自身抗原芯片筛查为抗体阴性的肌炎患者血清中寻找新自身抗体,筛选出32个肌炎中高表达的蛋白,用免疫印迹和ELISA法验证其中3个蛋白质,但是没有发现新的肌炎特异性抗体。以上研究为肌炎的诊断和疾病分型提供新的思路,并为抗MDA5、抗JO-1阳性肌炎的发病机制研究提供了新的靶标。
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Global analysis of protein expression in muscle tissues of dermatomyositis/polymyosisits patients demonstrated an association between dysferlin and human leucocyte antigen A
对皮肌炎/多发性肌病患者肌肉组织中蛋白质表达的整体分析表明,dysferlin 与人类白细胞抗原 A 之间存在关联
DOI:10.1093/rheumatology/kez085
发表时间:2019
期刊:Rheumatology
影响因子:5.5
作者:Xiao Yizhi;Zhu Honglin;Li Liya;Gao Siming;Liu Di;Dai Bingying;Li Qiuxiang;Duan Huiqian;Yang Huan;Li Quanzhen;Zhang Huali;Luo Hui;Zuo Xiaoxia
通讯作者:Zuo Xiaoxia
Calcinosis and malignancy are rare in Chinese adult patients with myositis and nuclear matrix protein 2 antibodies identified by an unlabeled immunoprecipitation assay
钙质沉着症和恶性肿瘤在中国成年肌炎患者中很少见,通过未标记的免疫沉淀试验鉴定出核基质蛋白 2 抗体
DOI:10.1007/s10067-018-4216-x
发表时间:2018
期刊:Clinical Rheumatology
影响因子:3.4
作者:张华莉
通讯作者:张华莉
The roles of neutrophil serine proteinases in idiopathic inflammatory myopathies.
中性粒细胞丝氨酸蛋白酶在特发性炎症性肌病中的作用
DOI:10.1186/s13075-018-1632-x
发表时间:2018-07-05
期刊:Arthritis research & therapy
影响因子:4.9
作者:Gao S;Zuo X;Liu D;Xiao Y;Zhu H;Zhang H;Luo H
通讯作者:Luo H
Coexistence of anti-HMGCR and anti-MDA5 identified by an unlabeled immunoprecipitation assay in a chinese patient cohort with myositis
通过未标记的免疫沉淀测定在中国肌炎患者队列中发现抗 HMGCR 和抗 MDA5 共存
DOI:10.1097/md.0000000000013236
发表时间:2018-11-01
期刊:MEDICINE
影响因子:1.6
作者:Huang, Li;Wang, Li;Xiao, Xianzhong
通讯作者:Xiao, Xianzhong
Increased Serum Matrix Metalloproteinase-9 Levels are Associated with Anti-Jo1 but not Anti-MDA5 in Myositis Patients
肌炎患者血清基质金属蛋白酶 9 水平升高与抗 Jo1 相关,但与抗 MDA5 无关
DOI:10.14336/ad.2018.1120
发表时间:2019-08
期刊:Aging and disease
影响因子:7.4
作者:Yanjuan Liu;Hui Luo;Li Wang;Caiyan Li;Liyun Liu;Li Huang;Ke Liu;Meidong Liu;Siming Gao;Yizhi Xiao;Honglin Zhu;Xiaoxia Zuo;Quan-Zhen Li;Huali Zhang
通讯作者:Huali Zhang
组蛋白乳酸化调控BATF2 m6A 修饰参与脓毒症急性肺损伤的机制研究
  • 批准号:
    82270097
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    52万元
  • 批准年份:
    2022
  • 负责人:
    张华莉
  • 依托单位:
抗MDA5抗体介导的NK细胞功能缺陷在肌炎合并急进型间质性肺疾病中的作用及机制研究
  • 批准号:
    82070018
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    张华莉
  • 依托单位:
热休克因子1对脓毒症骨髓抑制细胞动员和活化的影响及其机制
  • 批准号:
    81471897
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    72.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    张华莉
  • 依托单位:
HSPB1对心肌细胞氧化应激时氧化还原状态的调控及其机制研究
  • 批准号:
    81270279
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    70.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    张华莉
  • 依托单位:
KLF4对内毒素所致炎症介质基因表达的调控及其机制研究
  • 批准号:
    30571746
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    27.0万元
  • 批准年份:
    2005
  • 负责人:
    张华莉
  • 依托单位:
新的耳聋相关基因的克隆
  • 批准号:
    30100103
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    22.0万元
  • 批准年份:
    2001
  • 负责人:
    张华莉
  • 依托单位:
国内基金
海外基金