用SELEX技术体外筛选抗HBV的诱饵分子

嗜肝DNA病毒科复制中最独特和关键的步骤,是RNA茎环信号(ε)和病毒反转录酶(P蛋白)高度特异性结合,从而诱导前基因组RNA（pgRNA）选择性包装进入衣壳蛋白并启动反转录进行。但人类HBV P-ε复合物迄今不能在体外功能性重建，使得难以研究它们相互作用的细节。申请人计划将前期成功用于鸭HBV系统的经他本人建立并优化的SELEX技术,结合近一二年该领域的最新进展，修改后首次转用到人类HBV系统。将ε上茎核苷酸随机化，从产生的RNA文库中筛选和P蛋白高亲和力结合的适体，并鉴定分子内与P蛋白结合和priming重要的序列和结构。这将在理论上填补人类P-ε相互作用的空白，加深理解HBV复制的分子机理；实践上，那些筛选出的强结合但不支持priming的适体可成为新颖的诱饵分子干扰HBV复制。新发现的P-ε相互作用的关键位点，是发展P-ε特异性抑制剂的攻击靶点。